首都师范大学学报（自然科学版）
首都師範大學學報（自然科學版）
수도사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF CAPITAL NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2014年
1期
19-24
,共6页
几丁质合酶1%昼夜节律%菌丝生长%粗糙脉孢菌
幾丁質閤酶1%晝夜節律%菌絲生長%粗糙脈孢菌
궤정질합매1%주야절률%균사생장%조조맥포균
Chitin synthase 1%circadian conidiation rhythm%hyphal growth%Neurospora crassa
在丝状真菌中,几丁质是真菌细胞壁的主要成分之一,对维持细胞形态和结构起到了重要的作用.几丁质是由几丁质合酶(chitin synthase,CHS)催化合成的,几丁质合酶参与生物钟调节的生理活动.本文以丝状真菌粗糙脉孢菌几丁质合酶1(CHS-1)为研究对象,通过同源重组基因敲除技术、电转化、分生孢子过膜以及PCR鉴定的方法,获得了chs-1缺失突变菌株CHS-1 KO.通过竞争性生长管(racetube)培养分析发现:对照Ku70Rm和突变菌株CHS-1KO(Ku70Rm背景)均具有明显的分生孢子带,但分生孢子带昼夜节律周期缩短,直线生长速率显著减慢,ku70Rw菌丝生长长度是3.4±0.31 cm/24 h,而突变菌株CHS-1KV(Ku70RIP背景)菌丝生长长度是2.07±0.19 cm/24 h.并进一步结合细胞壁染色对细胞形态分析发现:变菌株CHS-1ko菌丝沿生长方向膨胀、分支变短.这些结果表明:几丁质合酶1在粗糙脉孢菌分生孢子带昼夜节律形成和菌丝生长中发挥重要的作用.
在絲狀真菌中,幾丁質是真菌細胞壁的主要成分之一,對維持細胞形態和結構起到瞭重要的作用.幾丁質是由幾丁質閤酶(chitin synthase,CHS)催化閤成的,幾丁質閤酶參與生物鐘調節的生理活動.本文以絲狀真菌粗糙脈孢菌幾丁質閤酶1(CHS-1)為研究對象,通過同源重組基因敲除技術、電轉化、分生孢子過膜以及PCR鑒定的方法,穫得瞭chs-1缺失突變菌株CHS-1 KO.通過競爭性生長管(racetube)培養分析髮現:對照Ku70Rm和突變菌株CHS-1KO(Ku70Rm揹景)均具有明顯的分生孢子帶,但分生孢子帶晝夜節律週期縮短,直線生長速率顯著減慢,ku70Rw菌絲生長長度是3.4±0.31 cm/24 h,而突變菌株CHS-1KV(Ku70RIP揹景)菌絲生長長度是2.07±0.19 cm/24 h.併進一步結閤細胞壁染色對細胞形態分析髮現:變菌株CHS-1ko菌絲沿生長方嚮膨脹、分支變短.這些結果錶明:幾丁質閤酶1在粗糙脈孢菌分生孢子帶晝夜節律形成和菌絲生長中髮揮重要的作用.
재사상진균중,궤정질시진균세포벽적주요성분지일,대유지세포형태화결구기도료중요적작용.궤정질시유궤정질합매(chitin synthase,CHS)최화합성적,궤정질합매삼여생물종조절적생리활동.본문이사상진균조조맥포균궤정질합매1(CHS-1)위연구대상,통과동원중조기인고제기술、전전화、분생포자과막이급PCR감정적방법,획득료chs-1결실돌변균주CHS-1 KO.통과경쟁성생장관(racetube)배양분석발현:대조Ku70Rm화돌변균주CHS-1KO(Ku70Rm배경)균구유명현적분생포자대,단분생포자대주야절률주기축단,직선생장속솔현저감만,ku70Rw균사생장장도시3.4±0.31 cm/24 h,이돌변균주CHS-1KV(Ku70RIP배경)균사생장장도시2.07±0.19 cm/24 h.병진일보결합세포벽염색대세포형태분석발현:변균주CHS-1ko균사연생장방향팽창、분지변단.저사결과표명:궤정질합매1재조조맥포균분생포자대주야절률형성화균사생장중발휘중요적작용.
