广东农业科学
廣東農業科學
엄동농업과학
GUANGDONG AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
1期
121-126
,共6页
刘姗%高玉莲%孙蓉%唐自钟%高静雷%陈惠
劉姍%高玉蓮%孫蓉%唐自鐘%高靜雷%陳惠
류산%고옥련%손용%당자종%고정뢰%진혜
金龙胆草%SRAP%PCR体系优化
金龍膽草%SRAP%PCR體繫優化
금룡담초%SRAP%PCR체계우화
建立适宜金龙胆草DNA的SRAP-PCR扩增体系,为金龙胆草分子标记打下基础.针对常规银染方法从是否固定、银染液组成、银染时间、显影液组成等方面优化了金龙胆草SRAP扩增产物的检测方法,同时探索了金龙胆草SRAP-PCR反应程序,并对金龙胆草SRAP-PCR反应体系的各影响因子进行优化.结果建立了一个银染步骤快速、高效的银染检查方法,筛选的退火温度为51.3℃,最佳SRAP-PCR反应体系(15 μL)为:DNA 40 ng,引物浓度0.7 μmol/L,dNTPs 0.25 mmol/L,Mg2+1.9 mmol/L,Taq聚合酶0.6 U,10×buffer 2 μL,双蒸水补足.该程序和体系能很好地满足金龙胆草基因组SRAP扩增的要求,SRAP标记应用于金龙胆草遗传研究是可行的.
建立適宜金龍膽草DNA的SRAP-PCR擴增體繫,為金龍膽草分子標記打下基礎.針對常規銀染方法從是否固定、銀染液組成、銀染時間、顯影液組成等方麵優化瞭金龍膽草SRAP擴增產物的檢測方法,同時探索瞭金龍膽草SRAP-PCR反應程序,併對金龍膽草SRAP-PCR反應體繫的各影響因子進行優化.結果建立瞭一箇銀染步驟快速、高效的銀染檢查方法,篩選的退火溫度為51.3℃,最佳SRAP-PCR反應體繫(15 μL)為:DNA 40 ng,引物濃度0.7 μmol/L,dNTPs 0.25 mmol/L,Mg2+1.9 mmol/L,Taq聚閤酶0.6 U,10×buffer 2 μL,雙蒸水補足.該程序和體繫能很好地滿足金龍膽草基因組SRAP擴增的要求,SRAP標記應用于金龍膽草遺傳研究是可行的.
건립괄의금룡담초DNA적SRAP-PCR확증체계,위금룡담초분자표기타하기출.침대상규은염방법종시부고정、은염액조성、은염시간、현영액조성등방면우화료금룡담초SRAP확증산물적검측방법,동시탐색료금룡담초SRAP-PCR반응정서,병대금룡담초SRAP-PCR반응체계적각영향인자진행우화.결과건립료일개은염보취쾌속、고효적은염검사방법,사선적퇴화온도위51.3℃,최가SRAP-PCR반응체계(15 μL)위:DNA 40 ng,인물농도0.7 μmol/L,dNTPs 0.25 mmol/L,Mg2+1.9 mmol/L,Taq취합매0.6 U,10×buffer 2 μL,쌍증수보족.해정서화체계능흔호지만족금룡담초기인조SRAP확증적요구,SRAP표기응용우금룡담초유전연구시가행적.
