东南大学学报(医学版)
東南大學學報(醫學版)
동남대학학보(의학판)
JOURNAL OF SOUTHEAST UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2014年
1期
9-11
,共3页
陈波%史振铎%邱祥政%韩从辉
陳波%史振鐸%邱祥政%韓從輝
진파%사진탁%구상정%한종휘
腺病毒%膀胱肿瘤%SEA基因
腺病毒%膀胱腫瘤%SEA基因
선병독%방광종류%SEA기인
adenovirus%bladder cancer%SEA gene
目的:构建由人端粒酶启动子(hTE RT)和缺氧诱导因子启动子(HIF)双向调控的携带SEA基因的选择性增殖腺病毒,体外试验其对肿瘤的杀伤功能.方法:将hTERT和HIF分别酶切、连接在缺陷型腺病毒的穿梭质粒的E1A和E1B序列前,调控E1A和E1B蛋白的表达,共同转染人胚肾293细胞进行同源重组,获得双调控选择性复制性腺病毒,进行PCR鉴定.获取病毒转染膀胱肿瘤细胞EJ,MTT检测细胞存活和生长情况.结果:淋巴细胞与肿瘤细胞共培养12、24、48 h,实验组肿瘤细胞明显少于对照组;MTT检测实验组在12、24、48 h活细胞数低于对照组.结论:成功构建了携带SEA基因的选择性腺病毒,且其可表达目的基因,对膀胱肿瘤细胞有一定的杀伤作用.
目的:構建由人耑粒酶啟動子(hTE RT)和缺氧誘導因子啟動子(HIF)雙嚮調控的攜帶SEA基因的選擇性增殖腺病毒,體外試驗其對腫瘤的殺傷功能.方法:將hTERT和HIF分彆酶切、連接在缺陷型腺病毒的穿梭質粒的E1A和E1B序列前,調控E1A和E1B蛋白的錶達,共同轉染人胚腎293細胞進行同源重組,穫得雙調控選擇性複製性腺病毒,進行PCR鑒定.穫取病毒轉染膀胱腫瘤細胞EJ,MTT檢測細胞存活和生長情況.結果:淋巴細胞與腫瘤細胞共培養12、24、48 h,實驗組腫瘤細胞明顯少于對照組;MTT檢測實驗組在12、24、48 h活細胞數低于對照組.結論:成功構建瞭攜帶SEA基因的選擇性腺病毒,且其可錶達目的基因,對膀胱腫瘤細胞有一定的殺傷作用.
목적:구건유인단립매계동자(hTE RT)화결양유도인자계동자(HIF)쌍향조공적휴대SEA기인적선택성증식선병독,체외시험기대종류적살상공능.방법:장hTERT화HIF분별매절、련접재결함형선병독적천사질립적E1A화E1B서렬전,조공E1A화E1B단백적표체,공동전염인배신293세포진행동원중조,획득쌍조공선택성복제성선병독,진행PCR감정.획취병독전염방광종류세포EJ,MTT검측세포존활화생장정황.결과:림파세포여종류세포공배양12、24、48 h,실험조종류세포명현소우대조조;MTT검측실험조재12、24、48 h활세포수저우대조조.결론:성공구건료휴대SEA기인적선택성선병독,차기가표체목적기인,대방광종류세포유일정적살상작용.