农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2014年
2期
141-149
,共9页
魏可%陈方兵%范聪丽%黎欢%李邢海%范安然%张学明%李子义
魏可%陳方兵%範聰麗%黎歡%李邢海%範安然%張學明%李子義
위가%진방병%범총려%려환%리형해%범안연%장학명%리자의
猪%诱导多能干细胞%启动子%甲基化
豬%誘導多能榦細胞%啟動子%甲基化
저%유도다능간세포%계동자%갑기화
Porcine%Induced pluripotent stem cells%Promoters%Methylation
DNA甲基化是一种十分重要的表观遗传修饰,与转座元件沉默、基因组印记以及X染色体失活等多种生物学过程相关.胚胎特异性转录因子的表达可以将已经分化的小鼠(Mus musculus)成纤维细胞重编程为诱导多能干细胞(iPSCs).由于在重编程过程中还伴随着一系列的表观遗传修饰变化,iPSCs可作为研究表观遗传特点的有利工具,用来研究表观遗传修饰的相互作用及其动态学过程.本研究中,从35 d的猪(Sus scrofa)胎儿分离出胎儿成纤维细胞(PFF),使用经典的4因子组合,即Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc将PFF重编程为iPSCs,并进行了多能标记的染色,结果表明,所得到的克隆呈现OCT4、SOX2、NANOG和SSEA1阳性结果.采用亚硫酸氢盐测序法对内源性多能性相关基因Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc的启动子区域甲基化进行了检测,发现其启动子甲基化程度很低,表明体细胞重编程为iPSCs的过程伴随着多能基因启动子甲基化程度的降低,为理解iPS重编程中多能性相关基因的DNA去甲基化过程和了解控制多能性相关基因的表观遗传调节提供基础.
DNA甲基化是一種十分重要的錶觀遺傳脩飾,與轉座元件沉默、基因組印記以及X染色體失活等多種生物學過程相關.胚胎特異性轉錄因子的錶達可以將已經分化的小鼠(Mus musculus)成纖維細胞重編程為誘導多能榦細胞(iPSCs).由于在重編程過程中還伴隨著一繫列的錶觀遺傳脩飾變化,iPSCs可作為研究錶觀遺傳特點的有利工具,用來研究錶觀遺傳脩飾的相互作用及其動態學過程.本研究中,從35 d的豬(Sus scrofa)胎兒分離齣胎兒成纖維細胞(PFF),使用經典的4因子組閤,即Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc將PFF重編程為iPSCs,併進行瞭多能標記的染色,結果錶明,所得到的剋隆呈現OCT4、SOX2、NANOG和SSEA1暘性結果.採用亞硫痠氫鹽測序法對內源性多能性相關基因Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc的啟動子區域甲基化進行瞭檢測,髮現其啟動子甲基化程度很低,錶明體細胞重編程為iPSCs的過程伴隨著多能基因啟動子甲基化程度的降低,為理解iPS重編程中多能性相關基因的DNA去甲基化過程和瞭解控製多能性相關基因的錶觀遺傳調節提供基礎.
DNA갑기화시일충십분중요적표관유전수식,여전좌원건침묵、기인조인기이급X염색체실활등다충생물학과정상관.배태특이성전록인자적표체가이장이경분화적소서(Mus musculus)성섬유세포중편정위유도다능간세포(iPSCs).유우재중편정과정중환반수착일계렬적표관유전수식변화,iPSCs가작위연구표관유전특점적유리공구,용래연구표관유전수식적상호작용급기동태학과정.본연구중,종35 d적저(Sus scrofa)태인분리출태인성섬유세포(PFF),사용경전적4인자조합,즉Oct4、Sox2、Klf4화c-Myc장PFF중편정위iPSCs,병진행료다능표기적염색,결과표명,소득도적극륭정현OCT4、SOX2、NANOG화SSEA1양성결과.채용아류산경염측서법대내원성다능성상관기인Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc적계동자구역갑기화진행료검측,발현기계동자갑기화정도흔저,표명체세포중편정위iPSCs적과정반수착다능기인계동자갑기화정도적강저,위리해iPS중편정중다능성상관기인적DNA거갑기화과정화료해공제다능성상관기인적표관유전조절제공기출.