中国医学科学院学报
中國醫學科學院學報
중국의학과학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SINICAE
2014年
1期
25-32
,共8页
胡浪%李大鹏%张志坚%王晓光%包卿%张锋%黄永辉
鬍浪%李大鵬%張誌堅%王曉光%包卿%張鋒%黃永輝
호랑%리대붕%장지견%왕효광%포경%장봉%황영휘
椎间盘退变%骨髓间充质干细胞%髓核细胞%藻酸盐%共培养
椎間盤退變%骨髓間充質榦細胞%髓覈細胞%藻痠鹽%共培養
추간반퇴변%골수간충질간세포%수핵세포%조산염%공배양
目的 研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)对退变髓核细胞(dNPCs)的营养修复作用.方法 针刺抽吸法制备SD大鼠退变椎间盘动物模型,分离培养髓核细胞(NPCs)及BMSCs,并将BMSCs和dNPCs分别复合藻酸盐后等比例接种于transwell共培养系统上下室中进行体外非直接接触共培养作为实验组,单纯NPCs和dNPCs分别复合藻酸盐后作为阳性及阴性对照组.光镜下观察细胞生长情况,选取合适细胞复合藻酸盐在共培养体系中培养7 d后回收各组NPCs,对回收细胞的CollagenⅠ、Ⅱ和Aggrecan行Western blot及免疫荧光检测,RT-PCR检测CollagenⅡ、SOX9和Aggrecan的mRNA的表达情况.结果共培养7 d后,RT-PCR检测结果显示BMSCs+dNPCs组的Collagen Ⅱ、SOX9和Aggrecan的mRNA表达接近NPCs组,但明显高于dNPCs组(P均＜0.05).Western blot检测结果显示BMSCs+dNPCs组的Collagen Ⅱ和Aggrecan含量接近甚至超过NPCs组,但明显高于dNPCs组(P均＜0.05);CollagenⅠ含量与NPCs组相近,但明显低于dNPCs组(P＜0.05).Collagen Ⅱ和Aggrecan免疫荧光染色结果显示,BMSCs+dNPCs组和dNPCs组胞质都被染成红色,在核周围着色较深,BMSCs+dNPCs组胞质着色范围及核周围深染范围明显大于dNPCs组.结论 在Transwell非直接接触共培养条件下,BMSCs能够促进dNPCs外基质的表达,提示BMSCs能够在一定程度上逆转椎间盘dNPCs的功能.
目的 研究骨髓間充質榦細胞(BMSCs)對退變髓覈細胞(dNPCs)的營養脩複作用.方法 針刺抽吸法製備SD大鼠退變椎間盤動物模型,分離培養髓覈細胞(NPCs)及BMSCs,併將BMSCs和dNPCs分彆複閤藻痠鹽後等比例接種于transwell共培養繫統上下室中進行體外非直接接觸共培養作為實驗組,單純NPCs和dNPCs分彆複閤藻痠鹽後作為暘性及陰性對照組.光鏡下觀察細胞生長情況,選取閤適細胞複閤藻痠鹽在共培養體繫中培養7 d後迴收各組NPCs,對迴收細胞的CollagenⅠ、Ⅱ和Aggrecan行Western blot及免疫熒光檢測,RT-PCR檢測CollagenⅡ、SOX9和Aggrecan的mRNA的錶達情況.結果共培養7 d後,RT-PCR檢測結果顯示BMSCs+dNPCs組的Collagen Ⅱ、SOX9和Aggrecan的mRNA錶達接近NPCs組,但明顯高于dNPCs組(P均＜0.05).Western blot檢測結果顯示BMSCs+dNPCs組的Collagen Ⅱ和Aggrecan含量接近甚至超過NPCs組,但明顯高于dNPCs組(P均＜0.05);CollagenⅠ含量與NPCs組相近,但明顯低于dNPCs組(P＜0.05).Collagen Ⅱ和Aggrecan免疫熒光染色結果顯示,BMSCs+dNPCs組和dNPCs組胞質都被染成紅色,在覈週圍著色較深,BMSCs+dNPCs組胞質著色範圍及覈週圍深染範圍明顯大于dNPCs組.結論 在Transwell非直接接觸共培養條件下,BMSCs能夠促進dNPCs外基質的錶達,提示BMSCs能夠在一定程度上逆轉椎間盤dNPCs的功能.
목적 연구골수간충질간세포(BMSCs)대퇴변수핵세포(dNPCs)적영양수복작용.방법 침자추흡법제비SD대서퇴변추간반동물모형,분리배양수핵세포(NPCs)급BMSCs,병장BMSCs화dNPCs분별복합조산염후등비례접충우transwell공배양계통상하실중진행체외비직접접촉공배양작위실험조,단순NPCs화dNPCs분별복합조산염후작위양성급음성대조조.광경하관찰세포생장정황,선취합괄세포복합조산염재공배양체계중배양7 d후회수각조NPCs,대회수세포적CollagenⅠ、Ⅱ화Aggrecan행Western blot급면역형광검측,RT-PCR검측CollagenⅡ、SOX9화Aggrecan적mRNA적표체정황.결과공배양7 d후,RT-PCR검측결과현시BMSCs+dNPCs조적Collagen Ⅱ、SOX9화Aggrecan적mRNA표체접근NPCs조,단명현고우dNPCs조(P균＜0.05).Western blot검측결과현시BMSCs+dNPCs조적Collagen Ⅱ화Aggrecan함량접근심지초과NPCs조,단명현고우dNPCs조(P균＜0.05);CollagenⅠ함량여NPCs조상근,단명현저우dNPCs조(P＜0.05).Collagen Ⅱ화Aggrecan면역형광염색결과현시,BMSCs+dNPCs조화dNPCs조포질도피염성홍색,재핵주위착색교심,BMSCs+dNPCs조포질착색범위급핵주위심염범위명현대우dNPCs조.결론 재Transwell비직접접촉공배양조건하,BMSCs능구촉진dNPCs외기질적표체,제시BMSCs능구재일정정도상역전추간반dNPCs적공능.
