中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2014年
1期
97-106
,共10页
张美玉%蔡铁全%孙丹丹%刘洋%崔悦%王丹巧
張美玉%蔡鐵全%孫丹丹%劉洋%崔悅%王丹巧
장미옥%채철전%손단단%류양%최열%왕단교
脑双位点微透析%高效液相色谱法%固定化酶反应器%电化学%乙酰胆碱%胆碱
腦雙位點微透析%高效液相色譜法%固定化酶反應器%電化學%乙酰膽堿%膽堿
뇌쌍위점미투석%고효액상색보법%고정화매반응기%전화학%을선담감%담감
目的 建立同步动态监测清醒自由活动状态下大鼠腹内侧前额叶皮质(mPFC)和海马细胞外液中乙酰胆碱(ACh)和胆碱(Ch)方法,用于药物干预下不同脑区胆碱类神经递质变化研究.方法 建立mPFC和海马双位点双通道同步微透析采样技术和高效液相色谱-柱后固定化酶反应器-电化学(HPLC-IMER-ECD)方法.通过对清醒自由活动大鼠mPFC和海马同步灌流透析取样,HPLC-IMER-ECD分析药物作用下大鼠mPFC和海马细胞外液中ACh和Ch的动态变化,验证该技术方法的可行性和适用性.结果大鼠mPFC和海马双套管植入术及透析采样后状态表现良好,表明脑双位点双通道同步微透析采样技术可行.HPLC-IMER-ECD 法测定ACh和Ch,两者浓度在0.02~2.00 μmol·L-1范围内线性关系良好,ACh最低检测限为10 nmol·L-1,Ch最低检测限为5 nmol·L-1(信噪比为3∶1).ACh 0.1,0.4和2.0 μmol·L-1日内精密度相对标准偏差为0.87%~1.83%,日间精密度为5.38%~6.80%; Ch日内精密度相对标准偏差为1.60%~2.91%,日间精密度相对标准偏差为5.56%~7.38%;ACh相对回收率为96.0%~113.0%,Ch为102.3%~109.2%.叠氮钠能明显降低mPFC和海马细胞外液中ACh(P<0.05),但能显著升高两脑区内Ch含量(P<0.05).人参皂苷Rg1可逆转叠氮钠导致的海马区ACh降低(P<0.05)及mPFC和海马区Ch含量的升高(P<0.05).mPFC细胞外液中ACh和Ch较高,受到叠氮钠影响较海马区更敏感.结论 脑双位点微透析结合HPLC-IMER-ECD方法能同步监测大鼠mPFC和海马中ACh和Ch含量变化.人参皂苷Rg1可通过调节脑内ACh和Ch动态平衡,增强中枢胆碱能系统的功能.
目的 建立同步動態鑑測清醒自由活動狀態下大鼠腹內側前額葉皮質(mPFC)和海馬細胞外液中乙酰膽堿(ACh)和膽堿(Ch)方法,用于藥物榦預下不同腦區膽堿類神經遞質變化研究.方法 建立mPFC和海馬雙位點雙通道同步微透析採樣技術和高效液相色譜-柱後固定化酶反應器-電化學(HPLC-IMER-ECD)方法.通過對清醒自由活動大鼠mPFC和海馬同步灌流透析取樣,HPLC-IMER-ECD分析藥物作用下大鼠mPFC和海馬細胞外液中ACh和Ch的動態變化,驗證該技術方法的可行性和適用性.結果大鼠mPFC和海馬雙套管植入術及透析採樣後狀態錶現良好,錶明腦雙位點雙通道同步微透析採樣技術可行.HPLC-IMER-ECD 法測定ACh和Ch,兩者濃度在0.02~2.00 μmol·L-1範圍內線性關繫良好,ACh最低檢測限為10 nmol·L-1,Ch最低檢測限為5 nmol·L-1(信譟比為3∶1).ACh 0.1,0.4和2.0 μmol·L-1日內精密度相對標準偏差為0.87%~1.83%,日間精密度為5.38%~6.80%; Ch日內精密度相對標準偏差為1.60%~2.91%,日間精密度相對標準偏差為5.56%~7.38%;ACh相對迴收率為96.0%~113.0%,Ch為102.3%~109.2%.疊氮鈉能明顯降低mPFC和海馬細胞外液中ACh(P<0.05),但能顯著升高兩腦區內Ch含量(P<0.05).人參皂苷Rg1可逆轉疊氮鈉導緻的海馬區ACh降低(P<0.05)及mPFC和海馬區Ch含量的升高(P<0.05).mPFC細胞外液中ACh和Ch較高,受到疊氮鈉影響較海馬區更敏感.結論 腦雙位點微透析結閤HPLC-IMER-ECD方法能同步鑑測大鼠mPFC和海馬中ACh和Ch含量變化.人參皂苷Rg1可通過調節腦內ACh和Ch動態平衡,增彊中樞膽堿能繫統的功能.
목적 건립동보동태감측청성자유활동상태하대서복내측전액협피질(mPFC)화해마세포외액중을선담감(ACh)화담감(Ch)방법,용우약물간예하불동뇌구담감류신경체질변화연구.방법 건립mPFC화해마쌍위점쌍통도동보미투석채양기술화고효액상색보-주후고정화매반응기-전화학(HPLC-IMER-ECD)방법.통과대청성자유활동대서mPFC화해마동보관류투석취양,HPLC-IMER-ECD분석약물작용하대서mPFC화해마세포외액중ACh화Ch적동태변화,험증해기술방법적가행성화괄용성.결과대서mPFC화해마쌍투관식입술급투석채양후상태표현량호,표명뇌쌍위점쌍통도동보미투석채양기술가행.HPLC-IMER-ECD 법측정ACh화Ch,량자농도재0.02~2.00 μmol·L-1범위내선성관계량호,ACh최저검측한위10 nmol·L-1,Ch최저검측한위5 nmol·L-1(신조비위3∶1).ACh 0.1,0.4화2.0 μmol·L-1일내정밀도상대표준편차위0.87%~1.83%,일간정밀도위5.38%~6.80%; Ch일내정밀도상대표준편차위1.60%~2.91%,일간정밀도상대표준편차위5.56%~7.38%;ACh상대회수솔위96.0%~113.0%,Ch위102.3%~109.2%.첩담납능명현강저mPFC화해마세포외액중ACh(P<0.05),단능현저승고량뇌구내Ch함량(P<0.05).인삼조감Rg1가역전첩담납도치적해마구ACh강저(P<0.05)급mPFC화해마구Ch함량적승고(P<0.05).mPFC세포외액중ACh화Ch교고,수도첩담납영향교해마구경민감.결론 뇌쌍위점미투석결합HPLC-IMER-ECD방법능동보감측대서mPFC화해마중ACh화Ch함량변화.인삼조감Rg1가통과조절뇌내ACh화Ch동태평형,증강중추담감능계통적공능.
