广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2014年
1期
56-58
,共3页
何洁儿%刘良平%詹姣%吴涵夫%张新愉
何潔兒%劉良平%詹姣%吳涵伕%張新愉
하길인%류량평%첨교%오함부%장신유
自噬作用%泛素%蛋白酶体%蛋白聚集物%p62
自噬作用%汎素%蛋白酶體%蛋白聚集物%p62
자서작용%범소%단백매체%단백취집물%p62
目的 在晶状体上皮细胞中通过蛋白酶抑制剂MG132抑制泛素-蛋白酶体途径活性,探索其对自噬作用的影响及相关机制.方法 使用蛋白酶抑制剂MG132作用于晶状体上皮细胞,阻断泛素-蛋白酶体途径的功能,通过蛋白免疫印迹法检测泛素化蛋白质水平评价泛素-蛋白酶体系统活性.蛋白免疫印迹法观察自噬作用活性标志蛋白LC3-Ⅱ的表达情况,共聚焦免疫荧光显微镜下观察LC3、p62的表达与分布.蛋白免疫印迹法检测p62表达的变化.结果 在MG132作用后,晶状体上皮细胞中泛素化蛋白聚集物明显增加.随着抑制时间的延长,LC3-Ⅱ的表达量也随之增加,自噬作用活性增强,p62的表达也明显增加.结论 在晶状体上皮细胞中,当泛素-蛋白酶体系统活性受抑制时自噬作用活性增强.
目的 在晶狀體上皮細胞中通過蛋白酶抑製劑MG132抑製汎素-蛋白酶體途徑活性,探索其對自噬作用的影響及相關機製.方法 使用蛋白酶抑製劑MG132作用于晶狀體上皮細胞,阻斷汎素-蛋白酶體途徑的功能,通過蛋白免疫印跡法檢測汎素化蛋白質水平評價汎素-蛋白酶體繫統活性.蛋白免疫印跡法觀察自噬作用活性標誌蛋白LC3-Ⅱ的錶達情況,共聚焦免疫熒光顯微鏡下觀察LC3、p62的錶達與分佈.蛋白免疫印跡法檢測p62錶達的變化.結果 在MG132作用後,晶狀體上皮細胞中汎素化蛋白聚集物明顯增加.隨著抑製時間的延長,LC3-Ⅱ的錶達量也隨之增加,自噬作用活性增彊,p62的錶達也明顯增加.結論 在晶狀體上皮細胞中,噹汎素-蛋白酶體繫統活性受抑製時自噬作用活性增彊.
목적 재정상체상피세포중통과단백매억제제MG132억제범소-단백매체도경활성,탐색기대자서작용적영향급상관궤제.방법 사용단백매억제제MG132작용우정상체상피세포,조단범소-단백매체도경적공능,통과단백면역인적법검측범소화단백질수평평개범소-단백매체계통활성.단백면역인적법관찰자서작용활성표지단백LC3-Ⅱ적표체정황,공취초면역형광현미경하관찰LC3、p62적표체여분포.단백면역인적법검측p62표체적변화.결과 재MG132작용후,정상체상피세포중범소화단백취집물명현증가.수착억제시간적연장,LC3-Ⅱ적표체량야수지증가,자서작용활성증강,p62적표체야명현증가.결론 재정상체상피세포중,당범소-단백매체계통활성수억제시자서작용활성증강.
