广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2014年
1期
29-32
,共4页
TIMP-3%肝癌%增殖%凋亡%细胞周期%侵袭
TIMP-3%肝癌%增殖%凋亡%細胞週期%侵襲
TIMP-3%간암%증식%조망%세포주기%침습
目的 建立以真核表达载体介导的过表达TIMP-3基因的肝癌细胞株(SMMC-7721和HepG2),探讨TIMP-3基因对两细胞增殖、凋亡、周期、侵袭等功能的影响.方法 将TIMP-3质粒pCMV6-AC-GFP/TIMP-3(TIMP-3组)和空载对照质粒pCMV6-AC-GFP(对照组)稳定转染入SMMC-7721和HepG2细胞株,用Western blot技术检测细胞内TIMP-3蛋白的表达,通过MTS实验、流式细胞术、侵袭实验测定细胞的各种生物学行为.结果 Western blot检测结果显示,TIMP-3组的SMMC-7721和HepG2细胞高表达TIMP-3蛋白,而对照组细胞没有TIMP-3蛋白表达.MTS实验和流式细胞术检测结果显示,与对照组比较,TIMP-3组两种细胞的增殖能力显著减弱(第5天时P=0.003,P=0.009),凋亡率显著升高(P=0.001,P=0.038),细胞周期停滞于G2/M期(P=0.030,P=0.034);体外侵袭实验结果显示,TIMP-3组两种细胞的侵袭能力较对照组显著下降(P=0.033,P=0.015).结论 TIMP-3能显著抑制SMMC-7721及HepG2细胞的增殖和侵袭能力,并诱导细胞发生凋亡和产生G2/M期阻滞.
目的 建立以真覈錶達載體介導的過錶達TIMP-3基因的肝癌細胞株(SMMC-7721和HepG2),探討TIMP-3基因對兩細胞增殖、凋亡、週期、侵襲等功能的影響.方法 將TIMP-3質粒pCMV6-AC-GFP/TIMP-3(TIMP-3組)和空載對照質粒pCMV6-AC-GFP(對照組)穩定轉染入SMMC-7721和HepG2細胞株,用Western blot技術檢測細胞內TIMP-3蛋白的錶達,通過MTS實驗、流式細胞術、侵襲實驗測定細胞的各種生物學行為.結果 Western blot檢測結果顯示,TIMP-3組的SMMC-7721和HepG2細胞高錶達TIMP-3蛋白,而對照組細胞沒有TIMP-3蛋白錶達.MTS實驗和流式細胞術檢測結果顯示,與對照組比較,TIMP-3組兩種細胞的增殖能力顯著減弱(第5天時P=0.003,P=0.009),凋亡率顯著升高(P=0.001,P=0.038),細胞週期停滯于G2/M期(P=0.030,P=0.034);體外侵襲實驗結果顯示,TIMP-3組兩種細胞的侵襲能力較對照組顯著下降(P=0.033,P=0.015).結論 TIMP-3能顯著抑製SMMC-7721及HepG2細胞的增殖和侵襲能力,併誘導細胞髮生凋亡和產生G2/M期阻滯.
목적 건립이진핵표체재체개도적과표체TIMP-3기인적간암세포주(SMMC-7721화HepG2),탐토TIMP-3기인대량세포증식、조망、주기、침습등공능적영향.방법 장TIMP-3질립pCMV6-AC-GFP/TIMP-3(TIMP-3조)화공재대조질립pCMV6-AC-GFP(대조조)은정전염입SMMC-7721화HepG2세포주,용Western blot기술검측세포내TIMP-3단백적표체,통과MTS실험、류식세포술、침습실험측정세포적각충생물학행위.결과 Western blot검측결과현시,TIMP-3조적SMMC-7721화HepG2세포고표체TIMP-3단백,이대조조세포몰유TIMP-3단백표체.MTS실험화류식세포술검측결과현시,여대조조비교,TIMP-3조량충세포적증식능력현저감약(제5천시P=0.003,P=0.009),조망솔현저승고(P=0.001,P=0.038),세포주기정체우G2/M기(P=0.030,P=0.034);체외침습실험결과현시,TIMP-3조량충세포적침습능력교대조조현저하강(P=0.033,P=0.015).결론 TIMP-3능현저억제SMMC-7721급HepG2세포적증식화침습능력,병유도세포발생조망화산생G2/M기조체.