石河子大学学报（自然科学版）
石河子大學學報（自然科學版）
석하자대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SHIHEZI UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2013年
6期
680-683
,共4页
刘昱成%孟庆玲%乔军%王国超%张倩%贺志昊%杨海波%陈创夫
劉昱成%孟慶玲%喬軍%王國超%張倩%賀誌昊%楊海波%陳創伕
류욱성%맹경령%교군%왕국초%장천%하지호%양해파%진창부
BVDV%E2基因%载体构建%原核表达
BVDV%E2基因%載體構建%原覈錶達
BVDV%E2기인%재체구건%원핵표체
Bovine viral diarrhea virus (BVDV)%E2 genes%vector construction%prokaryotic expression
为了对BVDV进行诊断,根据GenBank登录的BVDV-2 E2基因序列,设计特异性引物,对BVDV-2新疆分离株SW E2基因进行扩增,克隆入T载体中测序,然后亚克隆入BL21(DE3)表达载体pET-28a中,构建重组表达载体pET-28a-E2,并转化入大肠埃希氏菌中.用IPTG进行诱导重组菌,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物.SDSPAGE分析证实表达的重组融合蛋白相对分子量为32 ku;Western blot分析表明该重组蛋白可与BVDV-2多克隆抗体发生特异性血清学反应,证实表达的重组E2蛋白具有良好的反应原性,为BVDV-2诊断试剂研发奠定基础.
為瞭對BVDV進行診斷,根據GenBank登錄的BVDV-2 E2基因序列,設計特異性引物,對BVDV-2新疆分離株SW E2基因進行擴增,剋隆入T載體中測序,然後亞剋隆入BL21(DE3)錶達載體pET-28a中,構建重組錶達載體pET-28a-E2,併轉化入大腸埃希氏菌中.用IPTG進行誘導重組菌,SDS-PAGE和Western blot分析錶達產物.SDSPAGE分析證實錶達的重組融閤蛋白相對分子量為32 ku;Western blot分析錶明該重組蛋白可與BVDV-2多剋隆抗體髮生特異性血清學反應,證實錶達的重組E2蛋白具有良好的反應原性,為BVDV-2診斷試劑研髮奠定基礎.
위료대BVDV진행진단,근거GenBank등록적BVDV-2 E2기인서렬,설계특이성인물,대BVDV-2신강분리주SW E2기인진행확증,극륭입T재체중측서,연후아극륭입BL21(DE3)표체재체pET-28a중,구건중조표체재체pET-28a-E2,병전화입대장애희씨균중.용IPTG진행유도중조균,SDS-PAGE화Western blot분석표체산물.SDSPAGE분석증실표체적중조융합단백상대분자량위32 ku;Western blot분석표명해중조단백가여BVDV-2다극륭항체발생특이성혈청학반응,증실표체적중조E2단백구유량호적반응원성,위BVDV-2진단시제연발전정기출.
