厦门大学学报（自然科学版）
廈門大學學報（自然科學版）
하문대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2014年
1期
132-141
,共10页
蔡明夷%周鹏%韩坤煌%谢芳靖%张子平%王艺磊
蔡明夷%週鵬%韓坤煌%謝芳靖%張子平%王藝磊
채명이%주붕%한곤황%사방정%장자평%왕예뢰
大黄鱼%周期蛋白%周期蛋白依赖性蛋白激酶%cDNA全长%组织表达谱
大黃魚%週期蛋白%週期蛋白依賴性蛋白激酶%cDNA全長%組織錶達譜
대황어%주기단백%주기단백의뢰성단백격매%cDNA전장%조직표체보
Larimichthys crocea%cyclin%cyclin-dependent protein kinase%full length cDNA%tissue expression profiles
成熟促进因子(MPF)是诱导细胞从G2期转入M期的关键因子,在配子成熟过程中具有重要作用.MPF由周期蛋白B(cyclinB,CB)和周期蛋白依赖性蛋白激酶(CDK1,由cdc2基因编码)2个亚基组成.本研究克隆了大黄鱼(Larimichth ys crocea)cyclin B1(Lc-cb1)和cdc2(Lc-cdc2)基因的cDNA序列,并分析了这2个基因mRNA的组织表达特征,为解析MPF在大黄鱼性腺发育和配子成熟的作用机理奠定基础.Lc-cb1基因全长cDNA 1 882 bp,可编码397个氨基酸的蛋白;Lc-cdc2基因全长cDNA序列1 151 bp,可编码303个氨基酸的蛋白.基于Lc-cb1 cDNA序列推导的氨基酸序列与6种脊椎动物的CB1氨基酸序列有较高相似性(67％～84％),并具有周期蛋白盒、毁坏盒、以及蛋白酶K位点(RRxSK)等CB预期特征.基于Lc-cdc2的cDNA序列推导的氨基酸序列也与其他6种鱼类的CDK1氨酸酸序列有较高相似性(88％～97％),并具有丝氨酸/苏氨酸激酶催化结构域、ATP结合相关的保守序列(GxGxxGxV)、周期蛋白结合相关的PSTAIRE序列等CDK1的预期特征.可见,本研究克隆获得的2条序列是Lc-cb1和Lc-cdc2 cDNA全长.实时荧光定量PCR结果显示,Lc-cb1和Lc-cdc2的2个基因mRNA表达具有相似的组织特异性,在性腺中mRNA水平均远远高于其他组织,表明Lc-cb1和Lc-cdc2是大黄鱼性腺发育相关的重要基因.
成熟促進因子(MPF)是誘導細胞從G2期轉入M期的關鍵因子,在配子成熟過程中具有重要作用.MPF由週期蛋白B(cyclinB,CB)和週期蛋白依賴性蛋白激酶(CDK1,由cdc2基因編碼)2箇亞基組成.本研究剋隆瞭大黃魚(Larimichth ys crocea)cyclin B1(Lc-cb1)和cdc2(Lc-cdc2)基因的cDNA序列,併分析瞭這2箇基因mRNA的組織錶達特徵,為解析MPF在大黃魚性腺髮育和配子成熟的作用機理奠定基礎.Lc-cb1基因全長cDNA 1 882 bp,可編碼397箇氨基痠的蛋白;Lc-cdc2基因全長cDNA序列1 151 bp,可編碼303箇氨基痠的蛋白.基于Lc-cb1 cDNA序列推導的氨基痠序列與6種脊椎動物的CB1氨基痠序列有較高相似性(67％～84％),併具有週期蛋白盒、燬壞盒、以及蛋白酶K位點(RRxSK)等CB預期特徵.基于Lc-cdc2的cDNA序列推導的氨基痠序列也與其他6種魚類的CDK1氨痠痠序列有較高相似性(88％～97％),併具有絲氨痠/囌氨痠激酶催化結構域、ATP結閤相關的保守序列(GxGxxGxV)、週期蛋白結閤相關的PSTAIRE序列等CDK1的預期特徵.可見,本研究剋隆穫得的2條序列是Lc-cb1和Lc-cdc2 cDNA全長.實時熒光定量PCR結果顯示,Lc-cb1和Lc-cdc2的2箇基因mRNA錶達具有相似的組織特異性,在性腺中mRNA水平均遠遠高于其他組織,錶明Lc-cb1和Lc-cdc2是大黃魚性腺髮育相關的重要基因.
성숙촉진인자(MPF)시유도세포종G2기전입M기적관건인자,재배자성숙과정중구유중요작용.MPF유주기단백B(cyclinB,CB)화주기단백의뢰성단백격매(CDK1,유cdc2기인편마)2개아기조성.본연구극륭료대황어(Larimichth ys crocea)cyclin B1(Lc-cb1)화cdc2(Lc-cdc2)기인적cDNA서렬,병분석료저2개기인mRNA적조직표체특정,위해석MPF재대황어성선발육화배자성숙적작용궤리전정기출.Lc-cb1기인전장cDNA 1 882 bp,가편마397개안기산적단백;Lc-cdc2기인전장cDNA서렬1 151 bp,가편마303개안기산적단백.기우Lc-cb1 cDNA서렬추도적안기산서렬여6충척추동물적CB1안기산서렬유교고상사성(67％～84％),병구유주기단백합、훼배합、이급단백매K위점(RRxSK)등CB예기특정.기우Lc-cdc2적cDNA서렬추도적안기산서렬야여기타6충어류적CDK1안산산서렬유교고상사성(88％～97％),병구유사안산/소안산격매최화결구역、ATP결합상관적보수서렬(GxGxxGxV)、주기단백결합상관적PSTAIRE서렬등CDK1적예기특정.가견,본연구극륭획득적2조서렬시Lc-cb1화Lc-cdc2 cDNA전장.실시형광정량PCR결과현시,Lc-cb1화Lc-cdc2적2개기인mRNA표체구유상사적조직특이성,재성선중mRNA수평균원원고우기타조직,표명Lc-cb1화Lc-cdc2시대황어성선발육상관적중요기인.
