湖北农业科学
湖北農業科學
호북농업과학
2014年
1期
220-221,235
,共3页
单菌落PCR%重组克隆%发夹RNA
單菌落PCR%重組剋隆%髮夾RNA
단균락PCR%중조극륭%발협RNA
individual bacterial colonies PCR%recombinant clone%shRNA
以单菌落为模板进行PCR扩增,直接筛选插有发夹RNA(Small hairpin RNA,shRNA)干扰片段的重组阳性克隆.以圆滑单菌落为PCR模板,采用载体通用引物直接扩增目的片段,质粒测序验证PCR结果的正确性.结果表明,在筛选的6个菌落中均扩增出324 bp的目的条带,进一步进行测序分析鉴定,证实了菌落PCR阳性克隆含有发夹RNA干扰片段.单菌落PCR是一种简便、快速、可靠、有效筛选重组阳性克隆的方法.
以單菌落為模闆進行PCR擴增,直接篩選插有髮夾RNA(Small hairpin RNA,shRNA)榦擾片段的重組暘性剋隆.以圓滑單菌落為PCR模闆,採用載體通用引物直接擴增目的片段,質粒測序驗證PCR結果的正確性.結果錶明,在篩選的6箇菌落中均擴增齣324 bp的目的條帶,進一步進行測序分析鑒定,證實瞭菌落PCR暘性剋隆含有髮夾RNA榦擾片段.單菌落PCR是一種簡便、快速、可靠、有效篩選重組暘性剋隆的方法.
이단균락위모판진행PCR확증,직접사선삽유발협RNA(Small hairpin RNA,shRNA)간우편단적중조양성극륭.이원활단균락위PCR모판,채용재체통용인물직접확증목적편단,질립측서험증PCR결과적정학성.결과표명,재사선적6개균락중균확증출324 bp적목적조대,진일보진행측서분석감정,증실료균락PCR양성극륭함유발협RNA간우편단.단균락PCR시일충간편、쾌속、가고、유효사선중조양성극륭적방법.