中华皮肤科杂志
中華皮膚科雜誌
중화피부과잡지
Chinese Journal of Dermatology
2014年
2期
90-93
,共4页
倪春雅%高露娟%陈连军%窦侠
倪春雅%高露娟%陳連軍%竇俠
예춘아%고로연%진련군%두협
皮炎,特应性%屋尘螨%角蛋白细胞%胸腺基质淋巴生成素
皮炎,特應性%屋塵螨%角蛋白細胞%胸腺基質淋巴生成素
피염,특응성%옥진만%각단백세포%흉선기질림파생성소
Dermatitis,atopic%Dermatophagoides pteronyssinus%Keratinocytes%Thymic stromal lymphopoietin
目的 探讨尘螨变应原rDer p1在体外对角质形成细胞表达胸腺基质淋巴生成素(TSLP)的影响.方法 体外培养人角质形成细胞株HaCaT细胞,予以0.1、1和10 mg/L尘螨变应原rDer p1与蛋白酶活化受体2(PAR2)特异性激动剂SLGIKV(500 μmol/L)和拮抗剂VKGILS(500μmol/L)共培养,以无血清培养基为空白对照.用ELISA法和荧光定量PCR法检测各实验组和对照组TSLP蛋白及mRNA表达水平;通过激光共聚焦显微镜检测细胞内钙流变化分析rDer p1诱导HaCaT细胞产生TSLP和PAR2受体活化的关系.结果 1 mg/L和10 mg/L rDer p1组培养12 h上清中TSLP水平分别为(155.5±5.9) ng/L和(228.8±28.7) ng/L,显著高于空白对照组(54.3±13.9 ng/L,P＜ 0.01),TSLP表达水平随rDer p1浓度增加而升高.SLGIKV组TSLP表达[(166.2±8.8) ng/L]也显著高于空白对照组(P＜0.01).10mg/LrDer p1组和SLGIKV组TSLP mRNA相对表达量在8h最高,分别为(3.28±0.27)倍和(2.15±0.26)倍,与4h和24 h相比差异有统计学意义(P＜0.01).SLGIKV可引起HaCaT细胞钙内流增加;10 mg/L rDer p1也可引起HaCaT细胞钙内流增加,经过PAR2受体特异性阻断剂VKGILS(500 μmol/L)处理后再给予rDer p1刺激,细胞内钙内流峰值明显降低.结论 尘螨变应原rDer p1能够通过部分活化HaCaT细胞表面的PAR2受体诱导产生促炎细胞因子TSLP.
目的 探討塵螨變應原rDer p1在體外對角質形成細胞錶達胸腺基質淋巴生成素(TSLP)的影響.方法 體外培養人角質形成細胞株HaCaT細胞,予以0.1、1和10 mg/L塵螨變應原rDer p1與蛋白酶活化受體2(PAR2)特異性激動劑SLGIKV(500 μmol/L)和拮抗劑VKGILS(500μmol/L)共培養,以無血清培養基為空白對照.用ELISA法和熒光定量PCR法檢測各實驗組和對照組TSLP蛋白及mRNA錶達水平;通過激光共聚焦顯微鏡檢測細胞內鈣流變化分析rDer p1誘導HaCaT細胞產生TSLP和PAR2受體活化的關繫.結果 1 mg/L和10 mg/L rDer p1組培養12 h上清中TSLP水平分彆為(155.5±5.9) ng/L和(228.8±28.7) ng/L,顯著高于空白對照組(54.3±13.9 ng/L,P＜ 0.01),TSLP錶達水平隨rDer p1濃度增加而升高.SLGIKV組TSLP錶達[(166.2±8.8) ng/L]也顯著高于空白對照組(P＜0.01).10mg/LrDer p1組和SLGIKV組TSLP mRNA相對錶達量在8h最高,分彆為(3.28±0.27)倍和(2.15±0.26)倍,與4h和24 h相比差異有統計學意義(P＜0.01).SLGIKV可引起HaCaT細胞鈣內流增加;10 mg/L rDer p1也可引起HaCaT細胞鈣內流增加,經過PAR2受體特異性阻斷劑VKGILS(500 μmol/L)處理後再給予rDer p1刺激,細胞內鈣內流峰值明顯降低.結論 塵螨變應原rDer p1能夠通過部分活化HaCaT細胞錶麵的PAR2受體誘導產生促炎細胞因子TSLP.
목적 탐토진만변응원rDer p1재체외대각질형성세포표체흉선기질림파생성소(TSLP)적영향.방법 체외배양인각질형성세포주HaCaT세포,여이0.1、1화10 mg/L진만변응원rDer p1여단백매활화수체2(PAR2)특이성격동제SLGIKV(500 μmol/L)화길항제VKGILS(500μmol/L)공배양,이무혈청배양기위공백대조.용ELISA법화형광정량PCR법검측각실험조화대조조TSLP단백급mRNA표체수평;통과격광공취초현미경검측세포내개류변화분석rDer p1유도HaCaT세포산생TSLP화PAR2수체활화적관계.결과 1 mg/L화10 mg/L rDer p1조배양12 h상청중TSLP수평분별위(155.5±5.9) ng/L화(228.8±28.7) ng/L,현저고우공백대조조(54.3±13.9 ng/L,P＜ 0.01),TSLP표체수평수rDer p1농도증가이승고.SLGIKV조TSLP표체[(166.2±8.8) ng/L]야현저고우공백대조조(P＜0.01).10mg/LrDer p1조화SLGIKV조TSLP mRNA상대표체량재8h최고,분별위(3.28±0.27)배화(2.15±0.26)배,여4h화24 h상비차이유통계학의의(P＜0.01).SLGIKV가인기HaCaT세포개내류증가;10 mg/L rDer p1야가인기HaCaT세포개내류증가,경과PAR2수체특이성조단제VKGILS(500 μmol/L)처리후재급여rDer p1자격,세포내개내류봉치명현강저.결론 진만변응원rDer p1능구통과부분활화HaCaT세포표면적PAR2수체유도산생촉염세포인자TSLP.
