中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2014年
3期
244-249
,共6页
李枫%李华%梁海燕%黄艺%米利古%王仙%李永祥%申爱平%曹帅丽%袁俐
李楓%李華%樑海燕%黃藝%米利古%王仙%李永祥%申愛平%曹帥麗%袁俐
리풍%리화%량해연%황예%미리고%왕선%리영상%신애평%조수려%원리
结核分枝杆菌%北京/W系菌株%结核分枝杆菌抗原
結覈分枝桿菌%北京/W繫菌株%結覈分枝桿菌抗原
결핵분지간균%북경/W계균주%결핵분지간균항원
Mycobacterium tuberculosis%Beijing/W lineage strains%Mycobacterium tuberculosis antigens
目的 检测北京/W系和非北京/W系结核分枝杆菌HspX、Hsp65、38kDa、Ag85B和MPT64在基因、mRNA和蛋白水平有无差异,探讨5个重要蛋白对于北京/W系菌株广泛流行的可能作用.方法 收集结核分枝杆菌临床分离株,其中北京/W系与非北京/W系菌株各30株,运用DNA直接测序法检测北京/W系和非北京/W系菌株HspX、Hsp65、38 kDa、Ag85B和MPT64对应编码基因的PCR扩增产物,采用实时定量PCR技术检测细菌在对数生长期5个重要蛋白的编码基因mRNA的表达水平,使用Western blot技术检测细菌感染巨噬细胞24 h后5个蛋白在不同菌株中的表达水平.结果统计分析采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义.结果 HspX、Hsp65、38kDa、Ag85B和MPT64对应编码基因的PCR扩增产物测序均未发现突变.HspX、Hsp65在北京/W系菌株中的mRNA在对数生长期的表达差异均无统计学意义(P>0.05),而在感染巨噬细胞24 h后,细菌中两个热休克蛋白的表达高于非北京/W系菌株,差异有统计学意义(P<0.05).在细菌感染细胞前后,北京/W系菌株中38 kDa、Ag85B的mRNA和蛋白水平的表达均低于非北京/W系菌株,差异有统计学意义(P<0.05).MPT64在mRNA和蛋白水平的表达差异均无统计学意义(P>0.05).结论 与非北京/W系菌株比较,北京/W系菌株中HspX、Hsp65高表达,38 kDa、Ag85B表达较低,推测这几个蛋白表达的改变可能与北京/W系菌株的流行有一定的关系.
目的 檢測北京/W繫和非北京/W繫結覈分枝桿菌HspX、Hsp65、38kDa、Ag85B和MPT64在基因、mRNA和蛋白水平有無差異,探討5箇重要蛋白對于北京/W繫菌株廣汎流行的可能作用.方法 收集結覈分枝桿菌臨床分離株,其中北京/W繫與非北京/W繫菌株各30株,運用DNA直接測序法檢測北京/W繫和非北京/W繫菌株HspX、Hsp65、38 kDa、Ag85B和MPT64對應編碼基因的PCR擴增產物,採用實時定量PCR技術檢測細菌在對數生長期5箇重要蛋白的編碼基因mRNA的錶達水平,使用Western blot技術檢測細菌感染巨噬細胞24 h後5箇蛋白在不同菌株中的錶達水平.結果統計分析採用t檢驗,P<0.05為差異有統計學意義.結果 HspX、Hsp65、38kDa、Ag85B和MPT64對應編碼基因的PCR擴增產物測序均未髮現突變.HspX、Hsp65在北京/W繫菌株中的mRNA在對數生長期的錶達差異均無統計學意義(P>0.05),而在感染巨噬細胞24 h後,細菌中兩箇熱休剋蛋白的錶達高于非北京/W繫菌株,差異有統計學意義(P<0.05).在細菌感染細胞前後,北京/W繫菌株中38 kDa、Ag85B的mRNA和蛋白水平的錶達均低于非北京/W繫菌株,差異有統計學意義(P<0.05).MPT64在mRNA和蛋白水平的錶達差異均無統計學意義(P>0.05).結論 與非北京/W繫菌株比較,北京/W繫菌株中HspX、Hsp65高錶達,38 kDa、Ag85B錶達較低,推測這幾箇蛋白錶達的改變可能與北京/W繫菌株的流行有一定的關繫.
목적 검측북경/W계화비북경/W계결핵분지간균HspX、Hsp65、38kDa、Ag85B화MPT64재기인、mRNA화단백수평유무차이,탐토5개중요단백대우북경/W계균주엄범류행적가능작용.방법 수집결핵분지간균림상분리주,기중북경/W계여비북경/W계균주각30주,운용DNA직접측서법검측북경/W계화비북경/W계균주HspX、Hsp65、38 kDa、Ag85B화MPT64대응편마기인적PCR확증산물,채용실시정량PCR기술검측세균재대수생장기5개중요단백적편마기인mRNA적표체수평,사용Western blot기술검측세균감염거서세포24 h후5개단백재불동균주중적표체수평.결과통계분석채용t검험,P<0.05위차이유통계학의의.결과 HspX、Hsp65、38kDa、Ag85B화MPT64대응편마기인적PCR확증산물측서균미발현돌변.HspX、Hsp65재북경/W계균주중적mRNA재대수생장기적표체차이균무통계학의의(P>0.05),이재감염거서세포24 h후,세균중량개열휴극단백적표체고우비북경/W계균주,차이유통계학의의(P<0.05).재세균감염세포전후,북경/W계균주중38 kDa、Ag85B적mRNA화단백수평적표체균저우비북경/W계균주,차이유통계학의의(P<0.05).MPT64재mRNA화단백수평적표체차이균무통계학의의(P>0.05).결론 여비북경/W계균주비교,북경/W계균주중HspX、Hsp65고표체,38 kDa、Ag85B표체교저,추측저궤개단백표체적개변가능여북경/W계균주적류행유일정적관계.
