中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2014年
3期
430-437
,共8页
范彬%马礼坤%李谦%汪麟%周俊岭%吴佳纬
範彬%馬禮坤%李謙%汪麟%週俊嶺%吳佳緯
범빈%마례곤%리겸%왕린%주준령%오가위
伊马替尼%受体,血小板源性生长因子%心肌成纤维细胞%心肌纤维化
伊馬替尼%受體,血小闆源性生長因子%心肌成纖維細胞%心肌纖維化
이마체니%수체,혈소판원성생장인자%심기성섬유세포%심기섬유화
Imatinib%Receptors,platelet-derived growth factor%Myofibroblasts%Myocardial fibrosis
目的:探讨血小板源性生长因子(PDGFs)/PDGF受体(PDGFRs)信号通路拮抗剂伊马替尼(IMA)减轻醋酸去氧皮质酮(DOCA)诱导的盐敏感性高血压大鼠心肌纤维化的作用机制及PDGFs/PDGFRs信号通路在其中的作用.方法:60只雄性SD大鼠行右肾切除术,术后予以1%氯化钠和0.1%氯化钾饮水4周并随机分成3组:对照组、实验组(DOCA组)和治疗组(DOCA+IMA组).使用尾套法每2周测定1次大鼠动脉收缩压(SBP),苦味酸-天狼星红染色观察大鼠心肌间质纤维化程度和心肌血管周围胶原面积(PVCA)/血管腔面积(VA)比值,实时荧光定量PCR法检测心肌组织成纤维细胞特异蛋白1(FSP-1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、前胶原蛋白Ⅰ(procollagen Ⅰ)、前胶原蛋白Ⅲ(procollagen Ⅲ)、PDGFRα和PDGFRβ的mRNA含量,免疫组化法观察心肌组织波形蛋白(vimentin)、α-SMA、PDGFRα、PDGFRβ及磷酸化的PDGFRβ(p-PDGFRβ)的蛋白表达,免疫荧光法定位PDGFRα和PDGFRβ表达的细胞类型.结果:(1)干预第14天和第28天血压测定结果显示DOCA及DOCA+IMA组大鼠的SBP均明显高于对照组(P<0 01),而DOCA组与DOCA+IMA组的SBP无显著差异(P>0.05).干预第28天,DOCA组心肌间质纤维化程度和PVCA/VA比值明显高于对照组(P<0 01),DOCA+IMA组心肌间质纤维化程度和PVCA/VA比值虽高于对照组(P<0.05),但较DOCA组显著减小(P<0 01).(2)干预第14天,DOCA组的PDGFRα和PDGFRβ表达较对照组增加(P<0 01),DOCA+IMA组的PDGFRα和PDGFRβ 表达较DOCA组减少(P<0 01).干预第28天,与对照组相比,DOCA组的PDGFRβ、p-PDGFRβ、FSP-1、α-SMA、procollagenⅠ和procollagen Ⅲ表达明显增加(P<0 01),而PDGFRα的表达未见明显增加,组内比较显示PDGFRβ 表达大于PDGFRα,DOCA+IMA组PDGFRβ、p-PDGFRβ、FSP-1、α-SMA、procollagenⅠ和procollagen Ⅲ 表达较DOCA组减少(P<0 01).(3) 干预第28天,对照组大鼠心脏间质主要是vimentin阳性的成纤维细胞,α-SMA表达很少,DOCA组大鼠α-SMA阳性的梭形细胞(肌成纤维细胞)数量明显增加(P<0 01),DOCA+IMA组较DOCA组肌成纤维细胞数量均减少(P<0.05).(4)在成纤维细胞和肌成纤维细胞中检测到的PDGFRα蛋白表达呈阳性,而在血管平滑肌细胞(VSMCs)中未检测到.PDGFRβ蛋白不仅在成纤维细胞和肌成纤维细胞中表达呈阳性,而且在VSMCs中也有表达.结论:在DOCA诱导的盐敏感性高血压大鼠心肌纤维化中,PDGFRα主要在心肌纤维化早期发挥作用,而PDGFRβ在心肌纤维化的全程均起作用.PDGFRα和PDGFRβ表达定位于心脏成纤维细胞和肌成纤维细胞,伊马替尼能够减少肌成纤维细胞的数量,表明伊马替尼很可能通过抑制PDGFs/PDGFRs信号通路,减少成纤维细胞的增殖和转化生成肌成纤维细胞,从而减轻心肌纤维化.
目的:探討血小闆源性生長因子(PDGFs)/PDGF受體(PDGFRs)信號通路拮抗劑伊馬替尼(IMA)減輕醋痠去氧皮質酮(DOCA)誘導的鹽敏感性高血壓大鼠心肌纖維化的作用機製及PDGFs/PDGFRs信號通路在其中的作用.方法:60隻雄性SD大鼠行右腎切除術,術後予以1%氯化鈉和0.1%氯化鉀飲水4週併隨機分成3組:對照組、實驗組(DOCA組)和治療組(DOCA+IMA組).使用尾套法每2週測定1次大鼠動脈收縮壓(SBP),苦味痠-天狼星紅染色觀察大鼠心肌間質纖維化程度和心肌血管週圍膠原麵積(PVCA)/血管腔麵積(VA)比值,實時熒光定量PCR法檢測心肌組織成纖維細胞特異蛋白1(FSP-1)、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、前膠原蛋白Ⅰ(procollagen Ⅰ)、前膠原蛋白Ⅲ(procollagen Ⅲ)、PDGFRα和PDGFRβ的mRNA含量,免疫組化法觀察心肌組織波形蛋白(vimentin)、α-SMA、PDGFRα、PDGFRβ及燐痠化的PDGFRβ(p-PDGFRβ)的蛋白錶達,免疫熒光法定位PDGFRα和PDGFRβ錶達的細胞類型.結果:(1)榦預第14天和第28天血壓測定結果顯示DOCA及DOCA+IMA組大鼠的SBP均明顯高于對照組(P<0 01),而DOCA組與DOCA+IMA組的SBP無顯著差異(P>0.05).榦預第28天,DOCA組心肌間質纖維化程度和PVCA/VA比值明顯高于對照組(P<0 01),DOCA+IMA組心肌間質纖維化程度和PVCA/VA比值雖高于對照組(P<0.05),但較DOCA組顯著減小(P<0 01).(2)榦預第14天,DOCA組的PDGFRα和PDGFRβ錶達較對照組增加(P<0 01),DOCA+IMA組的PDGFRα和PDGFRβ 錶達較DOCA組減少(P<0 01).榦預第28天,與對照組相比,DOCA組的PDGFRβ、p-PDGFRβ、FSP-1、α-SMA、procollagenⅠ和procollagen Ⅲ錶達明顯增加(P<0 01),而PDGFRα的錶達未見明顯增加,組內比較顯示PDGFRβ 錶達大于PDGFRα,DOCA+IMA組PDGFRβ、p-PDGFRβ、FSP-1、α-SMA、procollagenⅠ和procollagen Ⅲ 錶達較DOCA組減少(P<0 01).(3) 榦預第28天,對照組大鼠心髒間質主要是vimentin暘性的成纖維細胞,α-SMA錶達很少,DOCA組大鼠α-SMA暘性的梭形細胞(肌成纖維細胞)數量明顯增加(P<0 01),DOCA+IMA組較DOCA組肌成纖維細胞數量均減少(P<0.05).(4)在成纖維細胞和肌成纖維細胞中檢測到的PDGFRα蛋白錶達呈暘性,而在血管平滑肌細胞(VSMCs)中未檢測到.PDGFRβ蛋白不僅在成纖維細胞和肌成纖維細胞中錶達呈暘性,而且在VSMCs中也有錶達.結論:在DOCA誘導的鹽敏感性高血壓大鼠心肌纖維化中,PDGFRα主要在心肌纖維化早期髮揮作用,而PDGFRβ在心肌纖維化的全程均起作用.PDGFRα和PDGFRβ錶達定位于心髒成纖維細胞和肌成纖維細胞,伊馬替尼能夠減少肌成纖維細胞的數量,錶明伊馬替尼很可能通過抑製PDGFs/PDGFRs信號通路,減少成纖維細胞的增殖和轉化生成肌成纖維細胞,從而減輕心肌纖維化.
목적:탐토혈소판원성생장인자(PDGFs)/PDGF수체(PDGFRs)신호통로길항제이마체니(IMA)감경작산거양피질동(DOCA)유도적염민감성고혈압대서심기섬유화적작용궤제급PDGFs/PDGFRs신호통로재기중적작용.방법:60지웅성SD대서행우신절제술,술후여이1%록화납화0.1%록화갑음수4주병수궤분성3조:대조조、실험조(DOCA조)화치료조(DOCA+IMA조).사용미투법매2주측정1차대서동맥수축압(SBP),고미산-천랑성홍염색관찰대서심기간질섬유화정도화심기혈관주위효원면적(PVCA)/혈관강면적(VA)비치,실시형광정량PCR법검측심기조직성섬유세포특이단백1(FSP-1)、α-평활기기동단백(α-SMA)、전효원단백Ⅰ(procollagen Ⅰ)、전효원단백Ⅲ(procollagen Ⅲ)、PDGFRα화PDGFRβ적mRNA함량,면역조화법관찰심기조직파형단백(vimentin)、α-SMA、PDGFRα、PDGFRβ급린산화적PDGFRβ(p-PDGFRβ)적단백표체,면역형광법정위PDGFRα화PDGFRβ표체적세포류형.결과:(1)간예제14천화제28천혈압측정결과현시DOCA급DOCA+IMA조대서적SBP균명현고우대조조(P<0 01),이DOCA조여DOCA+IMA조적SBP무현저차이(P>0.05).간예제28천,DOCA조심기간질섬유화정도화PVCA/VA비치명현고우대조조(P<0 01),DOCA+IMA조심기간질섬유화정도화PVCA/VA비치수고우대조조(P<0.05),단교DOCA조현저감소(P<0 01).(2)간예제14천,DOCA조적PDGFRα화PDGFRβ표체교대조조증가(P<0 01),DOCA+IMA조적PDGFRα화PDGFRβ 표체교DOCA조감소(P<0 01).간예제28천,여대조조상비,DOCA조적PDGFRβ、p-PDGFRβ、FSP-1、α-SMA、procollagenⅠ화procollagen Ⅲ표체명현증가(P<0 01),이PDGFRα적표체미견명현증가,조내비교현시PDGFRβ 표체대우PDGFRα,DOCA+IMA조PDGFRβ、p-PDGFRβ、FSP-1、α-SMA、procollagenⅠ화procollagen Ⅲ 표체교DOCA조감소(P<0 01).(3) 간예제28천,대조조대서심장간질주요시vimentin양성적성섬유세포,α-SMA표체흔소,DOCA조대서α-SMA양성적사형세포(기성섬유세포)수량명현증가(P<0 01),DOCA+IMA조교DOCA조기성섬유세포수량균감소(P<0.05).(4)재성섬유세포화기성섬유세포중검측도적PDGFRα단백표체정양성,이재혈관평활기세포(VSMCs)중미검측도.PDGFRβ단백불부재성섬유세포화기성섬유세포중표체정양성,이차재VSMCs중야유표체.결론:재DOCA유도적염민감성고혈압대서심기섬유화중,PDGFRα주요재심기섬유화조기발휘작용,이PDGFRβ재심기섬유화적전정균기작용.PDGFRα화PDGFRβ표체정위우심장성섬유세포화기성섬유세포,이마체니능구감소기성섬유세포적수량,표명이마체니흔가능통과억제PDGFs/PDGFRs신호통로,감소성섬유세포적증식화전화생성기성섬유세포,종이감경심기섬유화.
