安徽医药
安徽醫藥
안휘의약
ANHUI MEDICAL AND PHARMACEUTICAL JOURNAL
2014年
3期
437-440
,共4页
孙文洪%何金花%韩泽平%黄国贤%朱丽梨%何琨仪%陈炳豪
孫文洪%何金花%韓澤平%黃國賢%硃麗梨%何琨儀%陳炳豪
손문홍%하금화%한택평%황국현%주려리%하곤의%진병호
Hsa-miR-204%反义核苷酸%急性淋巴细胞白血病%苦参碱
Hsa-miR-204%反義覈苷痠%急性淋巴細胞白血病%苦參堿
Hsa-miR-204%반의핵감산%급성림파세포백혈병%고삼감
Hsa-miR-204%antisense oligonucleotides%acute lymphoblastic leukemia%matrine
目的 研究miR-204的反义核酸(anti-miR204 oligonucleotides,AMO-miR-204)联合苦参碱观察其对人急性淋巴细胞白血病细胞株(MOLT-4)生长与凋亡的影响及机制.方法 将一定浓度的人工合成的AMO-miR-204经脂质体包裹转染MOLT-4细胞,并联合不同浓度的苦参碱作用于MOLT-4细胞48 h后,采用MTT法检测单用AMO-miR-204、单用苦参碱及AMO-miR-204联合苦参碱对MOLT-4细胞增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞早期凋亡率;实时荧光定量RT-PCR检测细胞 Bcl-2mRNA 的表达水平;克隆形成抑制实验检测克隆形成能力.结果单用苦参碱的IC50为0.75 mg·L-1;苦参碱与阴性对照联合使用,IC50为0.29 mg·L-1,表现为相加作用;苦参碱与AMO- miR-204联合使用,IC50为0.07 mg·L-1,增敏倍数为10.7,表现为协同作用.流式细胞术结果显示:联合组比单用组早期凋亡率明显增高,凋亡率达25.4%.单用AMO-miR-204、苦参碱及两者联均能下调 Bcl-2mRNA基因的表达水平,对MOLT-4细胞克隆形成逐渐减小,其中两者联合的克隆数为(28±3.0).结论 AMO- miR-204可提高MOLT-4细胞对苦参碱的敏感性,其机制可能为通过下调Bcl-2 mRNA的表达水平,促进MOLT-4细胞早期凋亡,并抑制其克隆形成有关.
目的 研究miR-204的反義覈痠(anti-miR204 oligonucleotides,AMO-miR-204)聯閤苦參堿觀察其對人急性淋巴細胞白血病細胞株(MOLT-4)生長與凋亡的影響及機製.方法 將一定濃度的人工閤成的AMO-miR-204經脂質體包裹轉染MOLT-4細胞,併聯閤不同濃度的苦參堿作用于MOLT-4細胞48 h後,採用MTT法檢測單用AMO-miR-204、單用苦參堿及AMO-miR-204聯閤苦參堿對MOLT-4細胞增殖抑製作用,流式細胞術檢測細胞早期凋亡率;實時熒光定量RT-PCR檢測細胞 Bcl-2mRNA 的錶達水平;剋隆形成抑製實驗檢測剋隆形成能力.結果單用苦參堿的IC50為0.75 mg·L-1;苦參堿與陰性對照聯閤使用,IC50為0.29 mg·L-1,錶現為相加作用;苦參堿與AMO- miR-204聯閤使用,IC50為0.07 mg·L-1,增敏倍數為10.7,錶現為協同作用.流式細胞術結果顯示:聯閤組比單用組早期凋亡率明顯增高,凋亡率達25.4%.單用AMO-miR-204、苦參堿及兩者聯均能下調 Bcl-2mRNA基因的錶達水平,對MOLT-4細胞剋隆形成逐漸減小,其中兩者聯閤的剋隆數為(28±3.0).結論 AMO- miR-204可提高MOLT-4細胞對苦參堿的敏感性,其機製可能為通過下調Bcl-2 mRNA的錶達水平,促進MOLT-4細胞早期凋亡,併抑製其剋隆形成有關.
목적 연구miR-204적반의핵산(anti-miR204 oligonucleotides,AMO-miR-204)연합고삼감관찰기대인급성림파세포백혈병세포주(MOLT-4)생장여조망적영향급궤제.방법 장일정농도적인공합성적AMO-miR-204경지질체포과전염MOLT-4세포,병연합불동농도적고삼감작용우MOLT-4세포48 h후,채용MTT법검측단용AMO-miR-204、단용고삼감급AMO-miR-204연합고삼감대MOLT-4세포증식억제작용,류식세포술검측세포조기조망솔;실시형광정량RT-PCR검측세포 Bcl-2mRNA 적표체수평;극륭형성억제실험검측극륭형성능력.결과단용고삼감적IC50위0.75 mg·L-1;고삼감여음성대조연합사용,IC50위0.29 mg·L-1,표현위상가작용;고삼감여AMO- miR-204연합사용,IC50위0.07 mg·L-1,증민배수위10.7,표현위협동작용.류식세포술결과현시:연합조비단용조조기조망솔명현증고,조망솔체25.4%.단용AMO-miR-204、고삼감급량자련균능하조 Bcl-2mRNA기인적표체수평,대MOLT-4세포극륭형성축점감소,기중량자연합적극륭수위(28±3.0).결론 AMO- miR-204가제고MOLT-4세포대고삼감적민감성,기궤제가능위통과하조Bcl-2 mRNA적표체수평,촉진MOLT-4세포조기조망,병억제기극륭형성유관.
