CAJ | 학술논문

目的:探讨微小RNA-199a-5p(miR-199a-5p)在心肌肥大模型中的表达及对大鼠心肌细胞肥大的调控作用.方法:用腹主动脉缩窄术(TAAC)构建心肌肥大大鼠模型,体外培养新生Sprague-Dawley大鼠心肌细胞,用血管紧张素II(Ang II)诱导心肌细胞肥大,荧光定量PCR (qRT-PCR)检测动物血浆和心肌细胞miR-199a-5p含量;合成大鼠miR-199a-5p的拟似物(mimic)和抑制剂(inhibitor),用脂质体转染mimic和inhibitor进入心肌细胞,用qRT-PCR检测肥大基因心房钠尿因子和β-肌球蛋白重链mRNA的表达变化;用氚标亮氨酸掺入量检测细胞蛋白合成速率变化;用细胞荧光染色法检测细胞表面积变化.结果:TAAC 术后28 d,大鼠血浆miR-199a-5p的含量较对照组显著增加 (P<0.05),在Ang II诱导肥大的心肌细胞中,miR-199a-5p的表达量也较对照组显著增加.在心肌细胞中过表达miR-199a-5p,能使细胞肥大基因表达增加,蛋白合成速率加快,细胞表面积增大,而使用inhibitor阻遏miR-199a-5p的作用后,能抑制Ang II诱导的肥大基因表达、细胞蛋白合成速率和细胞表面积的变化.结论:心肌肥大动物和细胞模型中miR-199a-5p的表达发生上调.过表达miR-199a-5p能促进体外培养的心肌细胞肥大,而阻遏miR-199a-5p的作用能抑制Ang II诱导的心肌细胞肥大.
목적:탐토미소RNA-199a-5p(miR-199a-5p)재심기비대모형중적표체급대대서심기세포비대적조공작용.방법:용복주동맥축착술(TAAC)구건심기비대대서모형,체외배양신생Sprague-Dawley대서심기세포,용혈관긴장소II(Ang II)유도심기세포비대,형광정량PCR (qRT-PCR)검측동물혈장화심기세포miR-199a-5p함량;합성대서miR-199a-5p적의사물(mimic)화억제제(inhibitor),용지질체전염mimic화inhibitor진입심기세포,용qRT-PCR검측비대기인심방납뇨인자화β-기구단백중련mRNA적표체변화;용천표량안산참입량검측세포단백합성속솔변화;용세포형광염색법검측세포표면적변화.결과:TAAC 술후28 d,대서혈장miR-199a-5p적함량교대조조현저증가 (P<0.05),재Ang II유도비대적심기세포중,miR-199a-5p적표체량야교대조조현저증가.재심기세포중과표체miR-199a-5p,능사세포비대기인표체증가,단백합성속솔가쾌,세포표면적증대,이사용inhibitor조알miR-199a-5p적작용후,능억제Ang II유도적비대기인표체、세포단백합성속솔화세포표면적적변화.결론:심기비대동물화세포모형중miR-199a-5p적표체발생상조.과표체miR-199a-5p능촉진체외배양적심기세포비대,이조알miR-199a-5p적작용능억제Ang II유도적심기세포비대.