中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2014年
3期
385-393
,共9页
陈鲲%陈永顺%王雪君%陈韵帆%刘轲莉%陈凤佳%鲁建军
陳鯤%陳永順%王雪君%陳韻帆%劉軻莉%陳鳳佳%魯建軍
진곤%진영순%왕설군%진운범%류가리%진봉가%로건군
二十二碳六烯酸%HepG2细胞%半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9%颗粒酶B%细胞色素C%Smac 蛋白
二十二碳六烯痠%HepG2細胞%半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶9%顆粒酶B%細胞色素C%Smac 蛋白
이십이탄륙희산%HepG2세포%반광안산천동안산단백매9%과립매B%세포색소C%Smac 단백
Docosahexaenoic acids%HepG2 cells%Caspase-9%Granzyme B%Cytochrome C%Smac protein
目的:本研究探讨了二十二碳六烯酸乙酯(Et-DHA)对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响.方法:HepG2细胞用于检测Et-DHA的抑癌活性,MTT法检测Et-DHA对HepG2细胞的直接抑制作用,Hoechst 33258荧光染色观察细胞的形态特征,ELISA法检测Et-DHA处理后HepG2细胞的活性氧簇(ROS)释放量、总超氧化物歧化酶(SOD)和caspase-9活性,Western blotting法检测胞质和线粒体中Bax、Bak、Bid、Bcl-2、Smac和细胞色素C(Cyt C),以及胞质中cleaved caspase-8、cleaved caspase-9和cleaved caspase-3的水平;T细胞与HepG2细胞共培养,进一步观察Et-DHA处理后T细胞的增殖对HepG2细胞活性的影响,并检测了颗粒酶(granzyme)B的水平.结果:Et-DHA显著抑制HepG2细胞的生长(P＜0.05),这种抑制作用具浓度效应和时程效应;Et-DHA处理后HepG2细胞的ROS释放量增加,但总SOD活性无明显变化,caspase-9活性显著上升(P＜0.05);线粒体上的促凋亡蛋白Bax、Bak和Bid水平增加,而抑凋亡蛋白Bcl-2以及线粒体中Cyt C和Smac的水平降低,胞质中的Cyt C、Smac、cleaved caspase-8、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3以及cleaved Bid水平呈剂量性升高.另外 T细胞和HepG2细胞共培养组在Et-DHA的诱导下,HepG2细胞的凋亡程度与Et-DHA单独作用时相比进一步增加.在Et-DHA刺激下,T细胞内granzyme B上调,释放到HepG2 细胞内的granzyme B明显增多.结论:Et-DHA可能主要通过线粒体内源性途径以及caspase-8途径,激活caspase-3,诱导HepG2细胞凋亡,以及通过间接活化T细胞,促使 granzyme B增多,从而增强对HepG2细胞的毒性作用.
目的:本研究探討瞭二十二碳六烯痠乙酯(Et-DHA)對人肝癌HepG2細胞凋亡的影響.方法:HepG2細胞用于檢測Et-DHA的抑癌活性,MTT法檢測Et-DHA對HepG2細胞的直接抑製作用,Hoechst 33258熒光染色觀察細胞的形態特徵,ELISA法檢測Et-DHA處理後HepG2細胞的活性氧簇(ROS)釋放量、總超氧化物歧化酶(SOD)和caspase-9活性,Western blotting法檢測胞質和線粒體中Bax、Bak、Bid、Bcl-2、Smac和細胞色素C(Cyt C),以及胞質中cleaved caspase-8、cleaved caspase-9和cleaved caspase-3的水平;T細胞與HepG2細胞共培養,進一步觀察Et-DHA處理後T細胞的增殖對HepG2細胞活性的影響,併檢測瞭顆粒酶(granzyme)B的水平.結果:Et-DHA顯著抑製HepG2細胞的生長(P＜0.05),這種抑製作用具濃度效應和時程效應;Et-DHA處理後HepG2細胞的ROS釋放量增加,但總SOD活性無明顯變化,caspase-9活性顯著上升(P＜0.05);線粒體上的促凋亡蛋白Bax、Bak和Bid水平增加,而抑凋亡蛋白Bcl-2以及線粒體中Cyt C和Smac的水平降低,胞質中的Cyt C、Smac、cleaved caspase-8、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3以及cleaved Bid水平呈劑量性升高.另外 T細胞和HepG2細胞共培養組在Et-DHA的誘導下,HepG2細胞的凋亡程度與Et-DHA單獨作用時相比進一步增加.在Et-DHA刺激下,T細胞內granzyme B上調,釋放到HepG2 細胞內的granzyme B明顯增多.結論:Et-DHA可能主要通過線粒體內源性途徑以及caspase-8途徑,激活caspase-3,誘導HepG2細胞凋亡,以及通過間接活化T細胞,促使 granzyme B增多,從而增彊對HepG2細胞的毒性作用.
목적:본연구탐토료이십이탄륙희산을지(Et-DHA)대인간암HepG2세포조망적영향.방법:HepG2세포용우검측Et-DHA적억암활성,MTT법검측Et-DHA대HepG2세포적직접억제작용,Hoechst 33258형광염색관찰세포적형태특정,ELISA법검측Et-DHA처리후HepG2세포적활성양족(ROS)석방량、총초양화물기화매(SOD)화caspase-9활성,Western blotting법검측포질화선립체중Bax、Bak、Bid、Bcl-2、Smac화세포색소C(Cyt C),이급포질중cleaved caspase-8、cleaved caspase-9화cleaved caspase-3적수평;T세포여HepG2세포공배양,진일보관찰Et-DHA처리후T세포적증식대HepG2세포활성적영향,병검측료과립매(granzyme)B적수평.결과:Et-DHA현저억제HepG2세포적생장(P＜0.05),저충억제작용구농도효응화시정효응;Et-DHA처리후HepG2세포적ROS석방량증가,단총SOD활성무명현변화,caspase-9활성현저상승(P＜0.05);선립체상적촉조망단백Bax、Bak화Bid수평증가,이억조망단백Bcl-2이급선립체중Cyt C화Smac적수평강저,포질중적Cyt C、Smac、cleaved caspase-8、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3이급cleaved Bid수평정제량성승고.령외 T세포화HepG2세포공배양조재Et-DHA적유도하,HepG2세포적조망정도여Et-DHA단독작용시상비진일보증가.재Et-DHA자격하,T세포내granzyme B상조,석방도HepG2 세포내적granzyme B명현증다.결론:Et-DHA가능주요통과선립체내원성도경이급caspase-8도경,격활caspase-3,유도HepG2세포조망,이급통과간접활화T세포,촉사 granzyme B증다,종이증강대HepG2세포적독성작용.
