云南农业大学学报
雲南農業大學學報
운남농업대학학보
JOURNAL OF YUNNAN AGRICULTURAL UNIVERSITY
2014年
2期
161-166
,共6页
张丽芳%方敦煌%陈海如%赵兴能%徐伟伟
張麗芳%方敦煌%陳海如%趙興能%徐偉偉
장려방%방돈황%진해여%조흥능%서위위
烟草黑胫病菌%特异性引物%PCR%鉴定
煙草黑脛病菌%特異性引物%PCR%鑒定
연초흑경병균%특이성인물%PCR%감정
Phytophthora nicotianae%specific primers%PCR%identification
为了对不同来源的烟草黑胫病菌(Phytophora nicotianae)进行快速鉴定,设计并合成了一对特异性引物ITS8-1/ITS8-2,并与已经报道的特异性引物Pn1/Pn2和SP/AP对来自22个不同采样点烟草黑胫病菌DNA进行PCR扩增对比.结果发现特异性引物Pn1/Pn2和SP/AP对部分菌株不能扩增或扩增的条带较弱,而特异性引ITS8-1/ITS8-2则能扩增所有的供试菌株且扩增条带清晰,这表明该引物的特异性强于其他2对.用其他根茎病害病菌基因组DNA、烟草黑胫病组织和病土验证发现,引物ITS8-1/ITS8-2只能对烟草黑胫病菌、病组织、病土扩增出1条364 bp的特异性条带,与报道的P.nicotianae序列同源性为100％.证明该引物可适用于不同来源烟草黑胫病菌的鉴定、不同地点烟草黑胫病害的诊断.
為瞭對不同來源的煙草黑脛病菌(Phytophora nicotianae)進行快速鑒定,設計併閤成瞭一對特異性引物ITS8-1/ITS8-2,併與已經報道的特異性引物Pn1/Pn2和SP/AP對來自22箇不同採樣點煙草黑脛病菌DNA進行PCR擴增對比.結果髮現特異性引物Pn1/Pn2和SP/AP對部分菌株不能擴增或擴增的條帶較弱,而特異性引ITS8-1/ITS8-2則能擴增所有的供試菌株且擴增條帶清晰,這錶明該引物的特異性彊于其他2對.用其他根莖病害病菌基因組DNA、煙草黑脛病組織和病土驗證髮現,引物ITS8-1/ITS8-2隻能對煙草黑脛病菌、病組織、病土擴增齣1條364 bp的特異性條帶,與報道的P.nicotianae序列同源性為100％.證明該引物可適用于不同來源煙草黑脛病菌的鑒定、不同地點煙草黑脛病害的診斷.
위료대불동래원적연초흑경병균(Phytophora nicotianae)진행쾌속감정,설계병합성료일대특이성인물ITS8-1/ITS8-2,병여이경보도적특이성인물Pn1/Pn2화SP/AP대래자22개불동채양점연초흑경병균DNA진행PCR확증대비.결과발현특이성인물Pn1/Pn2화SP/AP대부분균주불능확증혹확증적조대교약,이특이성인ITS8-1/ITS8-2칙능확증소유적공시균주차확증조대청석,저표명해인물적특이성강우기타2대.용기타근경병해병균기인조DNA、연초흑경병조직화병토험증발현,인물ITS8-1/ITS8-2지능대연초흑경병균、병조직、병토확증출1조364 bp적특이성조대,여보도적P.nicotianae서렬동원성위100％.증명해인물가괄용우불동래원연초흑경병균적감정、불동지점연초흑경병해적진단.
