胃肠病学和肝病学杂志
胃腸病學和肝病學雜誌
위장병학화간병학잡지
CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY AND HEPATOLOGY
2014年
3期
319-322
,共4页
胡彦华%吴德全%姜明山%金光鑫%张雪松%胡彦建%李红影
鬍彥華%吳德全%薑明山%金光鑫%張雪鬆%鬍彥建%李紅影
호언화%오덕전%강명산%금광흠%장설송%호언건%리홍영
Notch信号通路%重组腺病毒%转染%肝癌%治疗
Notch信號通路%重組腺病毒%轉染%肝癌%治療
Notch신호통로%중조선병독%전염%간암%치료
Notch signaling%Recombinant retrovirus%Transfection%Hepatocellular carcinoma%Treatment
目的 构建人Notch1受体胞内段重组腺病毒并转染人肝癌细胞株HepG2,为Notch信号对肝癌侵袭转移的影响研究奠定实验基础.方法 构建Notch1受体胞内段(notch intracellular domain,NICD)基因的重组质粒pDC316-CMV-EGFP-CMV-Notch1-Myc,采用AdMax腺病毒包装系统将重组质粒与骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre共转染293细胞,同源重组产生重组腺病毒Ad-EGFP-NICD-Myc,RT-PCR鉴定重组腺病毒EGFP及NICD基因表达.重组腺病毒转染人肝癌细胞株HepG2,荧光显微镜观察EGFP及NICD蛋白的表达.结果 重组腺病毒Ad-EGFP-NICD-Myc经鉴定基因表达正确,此病毒转染入肝癌细胞株HepG2后阳性表达EGFP及NICD蛋白.结论 人Notch1受体胞内段重组腺病毒成功构建,为进一步Notch信号对肝癌侵袭转移的影响研究奠定了实验基础.
目的 構建人Notch1受體胞內段重組腺病毒併轉染人肝癌細胞株HepG2,為Notch信號對肝癌侵襲轉移的影響研究奠定實驗基礎.方法 構建Notch1受體胞內段(notch intracellular domain,NICD)基因的重組質粒pDC316-CMV-EGFP-CMV-Notch1-Myc,採用AdMax腺病毒包裝繫統將重組質粒與骨架質粒pBHGlox_E1,3Cre共轉染293細胞,同源重組產生重組腺病毒Ad-EGFP-NICD-Myc,RT-PCR鑒定重組腺病毒EGFP及NICD基因錶達.重組腺病毒轉染人肝癌細胞株HepG2,熒光顯微鏡觀察EGFP及NICD蛋白的錶達.結果 重組腺病毒Ad-EGFP-NICD-Myc經鑒定基因錶達正確,此病毒轉染入肝癌細胞株HepG2後暘性錶達EGFP及NICD蛋白.結論 人Notch1受體胞內段重組腺病毒成功構建,為進一步Notch信號對肝癌侵襲轉移的影響研究奠定瞭實驗基礎.
목적 구건인Notch1수체포내단중조선병독병전염인간암세포주HepG2,위Notch신호대간암침습전이적영향연구전정실험기출.방법 구건Notch1수체포내단(notch intracellular domain,NICD)기인적중조질립pDC316-CMV-EGFP-CMV-Notch1-Myc,채용AdMax선병독포장계통장중조질립여골가질립pBHGlox_E1,3Cre공전염293세포,동원중조산생중조선병독Ad-EGFP-NICD-Myc,RT-PCR감정중조선병독EGFP급NICD기인표체.중조선병독전염인간암세포주HepG2,형광현미경관찰EGFP급NICD단백적표체.결과 중조선병독Ad-EGFP-NICD-Myc경감정기인표체정학,차병독전염입간암세포주HepG2후양성표체EGFP급NICD단백.결론 인Notch1수체포내단중조선병독성공구건,위진일보Notch신호대간암침습전이적영향연구전정료실험기출.
