中国医药导报
中國醫藥導報
중국의약도보
CHINA MEDICAL HERALD
2014年
7期
19-22
,共4页
雪旺细胞%神经干细胞%细胞分化%联合培养%神经元
雪旺細胞%神經榦細胞%細胞分化%聯閤培養%神經元
설왕세포%신경간세포%세포분화%연합배양%신경원
Schwann cell%Neural stem cell%Cell differentiation%Co-culture%Neuron
目的 探讨激活态雪旺细胞(SCs)对神经干细胞(NSCs)的分化作用.方法 取出生24h内的SD乳鼠脊髓NSCs,分离培养并传至4代.取体重(100±5)g的SD大鼠,结扎右侧坐骨神经,1周后取双侧坐骨神经,左侧提取正常坐骨神经分离培养SCs(普通SCs),右侧提取结扎变性的坐骨神经分离培养SCs(激活态SCs),均采用双酶消化加差速贴壁法.将SCs与NSCs应用Transwell培养皿联合培养,分为三组:A组为激活态SCs与NSCs;B组为普通SCs与NSCs;C组仅为NSCs.于培养的第2、4、6天检测各组NSCs活性.1周后,Western blot检测各组SCs表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达水平,免疫荧光检测各组NSCs分化比例.结果 传至4代的NSCs生长稳定,分离的SCs 7 d后大量增殖呈旋涡状.联合培养后MTT法检测细胞活性,第2、4天三组细胞的活性差异无统计学意义(P＞0.05),第6天C组活细胞比例开始降低,A、B组与C组比较差异有统计学意义(P＜0.05),A组与B组比较差异无统计学意义(P＞0.05).Western blot检测A组细胞表皮生长因子(EGF)表达水平(0.486±0.028)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达水平(0.385±0.023)均高于B组,差异有统计学意义(P＜0.05).MAP-2荧光染色,每高倍视野阳性细胞比例A组[(35.26±2.53)％]高于B组[(27.63±3.45)％],差异有统计学意义(P＜ 0.05);GFAP荧光染色,每高倍视野阳性细胞比例A组[(62.42±3.78)％]低于B组[(70.18±1.26)％],差异有统计学意义(P＜ 0.05).结论 激活态SCs能够促进NSCs向神经元的分化进程,提高神经元的分化比例.
目的 探討激活態雪旺細胞(SCs)對神經榦細胞(NSCs)的分化作用.方法 取齣生24h內的SD乳鼠脊髓NSCs,分離培養併傳至4代.取體重(100±5)g的SD大鼠,結扎右側坐骨神經,1週後取雙側坐骨神經,左側提取正常坐骨神經分離培養SCs(普通SCs),右側提取結扎變性的坐骨神經分離培養SCs(激活態SCs),均採用雙酶消化加差速貼壁法.將SCs與NSCs應用Transwell培養皿聯閤培養,分為三組:A組為激活態SCs與NSCs;B組為普通SCs與NSCs;C組僅為NSCs.于培養的第2、4、6天檢測各組NSCs活性.1週後,Western blot檢測各組SCs錶皮生長因子(EGF)和堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)的錶達水平,免疫熒光檢測各組NSCs分化比例.結果 傳至4代的NSCs生長穩定,分離的SCs 7 d後大量增殖呈鏇渦狀.聯閤培養後MTT法檢測細胞活性,第2、4天三組細胞的活性差異無統計學意義(P＞0.05),第6天C組活細胞比例開始降低,A、B組與C組比較差異有統計學意義(P＜0.05),A組與B組比較差異無統計學意義(P＞0.05).Western blot檢測A組細胞錶皮生長因子(EGF)錶達水平(0.486±0.028)、堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)錶達水平(0.385±0.023)均高于B組,差異有統計學意義(P＜0.05).MAP-2熒光染色,每高倍視野暘性細胞比例A組[(35.26±2.53)％]高于B組[(27.63±3.45)％],差異有統計學意義(P＜ 0.05);GFAP熒光染色,每高倍視野暘性細胞比例A組[(62.42±3.78)％]低于B組[(70.18±1.26)％],差異有統計學意義(P＜ 0.05).結論 激活態SCs能夠促進NSCs嚮神經元的分化進程,提高神經元的分化比例.
목적 탐토격활태설왕세포(SCs)대신경간세포(NSCs)적분화작용.방법 취출생24h내적SD유서척수NSCs,분리배양병전지4대.취체중(100±5)g적SD대서,결찰우측좌골신경,1주후취쌍측좌골신경,좌측제취정상좌골신경분리배양SCs(보통SCs),우측제취결찰변성적좌골신경분리배양SCs(격활태SCs),균채용쌍매소화가차속첩벽법.장SCs여NSCs응용Transwell배양명연합배양,분위삼조:A조위격활태SCs여NSCs;B조위보통SCs여NSCs;C조부위NSCs.우배양적제2、4、6천검측각조NSCs활성.1주후,Western blot검측각조SCs표피생장인자(EGF)화감성성섬유세포생장인자(bFGF)적표체수평,면역형광검측각조NSCs분화비례.결과 전지4대적NSCs생장은정,분리적SCs 7 d후대량증식정선와상.연합배양후MTT법검측세포활성,제2、4천삼조세포적활성차이무통계학의의(P＞0.05),제6천C조활세포비례개시강저,A、B조여C조비교차이유통계학의의(P＜0.05),A조여B조비교차이무통계학의의(P＞0.05).Western blot검측A조세포표피생장인자(EGF)표체수평(0.486±0.028)、감성성섬유세포생장인자(bFGF)표체수평(0.385±0.023)균고우B조,차이유통계학의의(P＜0.05).MAP-2형광염색,매고배시야양성세포비례A조[(35.26±2.53)％]고우B조[(27.63±3.45)％],차이유통계학의의(P＜ 0.05);GFAP형광염색,매고배시야양성세포비례A조[(62.42±3.78)％]저우B조[(70.18±1.26)％],차이유통계학의의(P＜ 0.05).결론 격활태SCs능구촉진NSCs향신경원적분화진정,제고신경원적분화비례.
