中国医药工业杂志
中國醫藥工業雜誌
중국의약공업잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACEUTICALS
2014年
9期
826-829
,共4页
易喻%高虹%陈建澍%朱克寅%应国清
易喻%高虹%陳建澍%硃剋寅%應國清
역유%고홍%진건주%주극인%응국청
HCG抗体%水解%木瓜蛋白酶%纯化%Fab片段
HCG抗體%水解%木瓜蛋白酶%純化%Fab片段
HCG항체%수해%목과단백매%순화%Fab편단
HCG monoclonal antibody%hydrolysis%papain%purification%Fab fragment
采用温敏载体NHS-PNIPAM固定化木瓜蛋白酶,水解β-HCG单克隆抗体制备Fab片段,并优化水解工艺.结果表明:30℃,在pH 7.0的磷酸盐缓冲液中(含10 mmol/L半胱氨酸,2 mmol/L EDTA),加酶量40 u·(mg抗体)-1,转速180 r/min,反应3h,β-HCG抗体的转化率大于98.0%,主要生成目的产物Fab片段.酶解产物通过Protein L亲和色谱法分离纯化,得到的Fab片段回收率为74.5%,纯度为98.6%.
採用溫敏載體NHS-PNIPAM固定化木瓜蛋白酶,水解β-HCG單剋隆抗體製備Fab片段,併優化水解工藝.結果錶明:30℃,在pH 7.0的燐痠鹽緩遲液中(含10 mmol/L半胱氨痠,2 mmol/L EDTA),加酶量40 u·(mg抗體)-1,轉速180 r/min,反應3h,β-HCG抗體的轉化率大于98.0%,主要生成目的產物Fab片段.酶解產物通過Protein L親和色譜法分離純化,得到的Fab片段迴收率為74.5%,純度為98.6%.
채용온민재체NHS-PNIPAM고정화목과단백매,수해β-HCG단극륭항체제비Fab편단,병우화수해공예.결과표명:30℃,재pH 7.0적린산염완충액중(함10 mmol/L반광안산,2 mmol/L EDTA),가매량40 u·(mg항체)-1,전속180 r/min,반응3h,β-HCG항체적전화솔대우98.0%,주요생성목적산물Fab편단.매해산물통과Protein L친화색보법분리순화,득도적Fab편단회수솔위74.5%,순도위98.6%.