CAJ | 학술논문

为了建立一种检测独一味mRNA表达水平的SYBR Green Ⅰ荧光定量Real-Time PCR方法.根据独一味查尔酮合成酶(LrCHS)和苯丙氨酸解氨酶(LrPAL)基因序列设计特异性引物,运用Real-Time RT-PCR方法建立独一味基因的荧光定量标准曲线,进一步研究独一味CHS和PAL基因在不同组织中的表达.结果显示,扩增曲线在1×105～1×1011 copies/μL范围内有很好的线性关系,扩增相关系数在0.995以上.熔解曲线分析表明,产物为特异单峰,无引物二聚体,具有较高的特异性和灵敏度.独一味CHS基因在不同组织中表达量顺序为花＞叶＞叶柄＞根＞茎,PAL基因表达量顺序为叶柄＞叶＞花＞根＞茎.建立的检测方法能够成功用于独一味CHS和PAL基因表达的检测,为研究独一味在mRNA水平的定量分析提供技术平台.
위료건립일충검측독일미mRNA표체수평적SYBR Green Ⅰ형광정량Real-Time PCR방법.근거독일미사이동합성매(LrCHS)화분병안산해안매(LrPAL)기인서렬설계특이성인물,운용Real-Time RT-PCR방법건립독일미기인적형광정량표준곡선,진일보연구독일미CHS화PAL기인재불동조직중적표체.결과현시,확증곡선재1×105～1×1011 copies/μL범위내유흔호적선성관계,확증상관계수재0.995이상.용해곡선분석표명,산물위특이단봉,무인물이취체,구유교고적특이성화령민도.독일미CHS기인재불동조직중표체량순서위화＞협＞협병＞근＞경,PAL기인표체량순서위협병＞협＞화＞근＞경.건립적검측방법능구성공용우독일미CHS화PAL기인표체적검측,위연구독일미재mRNA수평적정량분석제공기술평태.