哈尔滨医科大学学报
哈爾濱醫科大學學報
합이빈의과대학학보
JOURNAL OF HARBIN MEDICAL UNIVERSITY
2014年
2期
91-94,封4
,共5页
周曼%杨万超%刘翔%于淼%李文志
週曼%楊萬超%劉翔%于淼%李文誌
주만%양만초%류상%우묘%리문지
星形胶质细胞%原代培养%纯化%鉴定
星形膠質細胞%原代培養%純化%鑒定
성형효질세포%원대배양%순화%감정
astrocytes%primary culture%purification%identification
目的 探索大鼠脑星形胶质细胞(astrocytcs,AS)的分离、培养及对原代培养的AS进行纯化的方法并进行改进,提高AS纯度,为研究AS的生物学作用提供模型.方法 取新生1～3d的SD大鼠大脑,冰板上去除嗅球及海马,仔细剥离软脑膜,吸管反复轻柔吹打制备成细胞悬液,差速贴壁去除成纤维细胞,原代培养7～12 d,待细胞相互融合并铺满培养瓶底部后,3次消化传代,胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillary acidic protein,GFAP)进行免疫荧光鉴定.比较方法改进前后AS纯度的变化.结果 采用本实验改进的方法所分离培养出的AS纯度可达95％以上,方法改进后较改进前所培养的AS细胞GFAP免疫荧光阳性率(即AS细胞纯度)显著提高(P＜0.05).结论 经改进后的AS培养方法能够获取高纯度的AS,用于建立AS体外模型及研究体系.
目的 探索大鼠腦星形膠質細胞(astrocytcs,AS)的分離、培養及對原代培養的AS進行純化的方法併進行改進,提高AS純度,為研究AS的生物學作用提供模型.方法 取新生1～3d的SD大鼠大腦,冰闆上去除嗅毬及海馬,仔細剝離軟腦膜,吸管反複輕柔吹打製備成細胞懸液,差速貼壁去除成纖維細胞,原代培養7～12 d,待細胞相互融閤併鋪滿培養瓶底部後,3次消化傳代,膠質纖維痠性蛋白(glialfibrillary acidic protein,GFAP)進行免疫熒光鑒定.比較方法改進前後AS純度的變化.結果 採用本實驗改進的方法所分離培養齣的AS純度可達95％以上,方法改進後較改進前所培養的AS細胞GFAP免疫熒光暘性率(即AS細胞純度)顯著提高(P＜0.05).結論 經改進後的AS培養方法能夠穫取高純度的AS,用于建立AS體外模型及研究體繫.
목적 탐색대서뇌성형효질세포(astrocytcs,AS)적분리、배양급대원대배양적AS진행순화적방법병진행개진,제고AS순도,위연구AS적생물학작용제공모형.방법 취신생1～3d적SD대서대뇌,빙판상거제후구급해마,자세박리연뇌막,흡관반복경유취타제비성세포현액,차속첩벽거제성섬유세포,원대배양7～12 d,대세포상호융합병포만배양병저부후,3차소화전대,효질섬유산성단백(glialfibrillary acidic protein,GFAP)진행면역형광감정.비교방법개진전후AS순도적변화.결과 채용본실험개진적방법소분리배양출적AS순도가체95％이상,방법개진후교개진전소배양적AS세포GFAP면역형광양성솔(즉AS세포순도)현저제고(P＜0.05).결론 경개진후적AS배양방법능구획취고순도적AS,용우건립AS체외모형급연구체계.
