带myc标签的人造血相关PBX相互作用蛋白真核表达载体的构建及其功能研究
대myc표첨적인조혈상관PBX상호작용단백진핵표체재체적구건급기공능연구
Construction of myc-Tagged Human HPIP Eukaryotic Expression Vector and its Activity Detection
  • 万方数据
    生物技术通讯 생물기술통신
    LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
    2014年 3期 369-372 ,共4页

    李玲%闫志风%蒋昊%冯滢滢%冀全博%黄蓉%周丽英%王鹏%徐小洁

    리령%염지풍%장호%풍형형%기전박%황용%주려영%왕붕%서소길

    造血相关PBX相互作用蛋白%克隆%真核表达 造血相關PBX相互作用蛋白%剋隆%真覈錶達
    조혈상관PBX상호작용단백%극륭%진핵표체
    hematopoietic PBX-interacting protein%cloning%eukaryotic expression
    目的:构建带myc标签的造血相关PBX相互作用蛋白(HPIP)的真核表达载体,获得myc-HPIP融合蛋白,并对其生物学功能进行初步检测.方法:以本实验室保存的pcDNA3.0-HPIP质粒为模板,采用PCR技术扩增HPIP编码序列,将其插入pXJ-40-myc载体,通过Western印迹检测表达情况;将重组质粒与空载体分别转染人肝癌HepG2细胞,通过Western印迹检测其对AKT、ERK信号通路中AKT、ERK磷酸化水平的影响.结果:双酶切和测序结果表明myc-HPIP真核表达质粒构建成功,转染HepG2细胞后表达了myc-HPIP融合蛋白;Western印迹证明myc-HPIP可升高AKT、ERK的磷酸化水平.结论:构建了带myc标签的人HPIP真核表达载体,为进一步研究HPIP在肿瘤发生发展中的功能奠定了基础.
    목적:구건대myc표첨적조혈상관PBX상호작용단백(HPIP)적진핵표체재체,획득myc-HPIP융합단백,병대기생물학공능진행초보검측.방법:이본실험실보존적pcDNA3.0-HPIP질립위모판,채용PCR기술확증HPIP편마서렬,장기삽입pXJ-40-myc재체,통과Western인적검측표체정황;장중조질립여공재체분별전염인간암HepG2세포,통과Western인적검측기대AKT、ERK신호통로중AKT、ERK린산화수평적영향.결과:쌍매절화측서결과표명myc-HPIP진핵표체질립구건성공,전염HepG2세포후표체료myc-HPIP융합단백;Western인적증명myc-HPIP가승고AKT、ERK적린산화수평.결론:구건료대myc표첨적인HPIP진핵표체재체,위진일보연구HPIP재종류발생발전중적공능전정료기출.
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