贵阳医学院学报
貴暘醫學院學報
귀양의학원학보
JOURNAL OF GUIYANG MEDICAL COLLEGE
2014年
1期
12-17
,共6页
廉芳%葛章文%李红%陆核%刘杰麟
廉芳%葛章文%李紅%陸覈%劉傑麟
렴방%갈장문%리홍%륙핵%류걸린
肿瘤干细胞%乳腺肿瘤%细胞培养%胰岛素%无血清培养基%Hoechst染色
腫瘤榦細胞%乳腺腫瘤%細胞培養%胰島素%無血清培養基%Hoechst染色
종류간세포%유선종류%세포배양%이도소%무혈청배양기%Hoechst염색
tumor stem cells%breast tumor%cell culture%insulin%serum free medium%hoechst staining
目的:探讨富集乳腺癌干细胞的方法,以获得稳定数量的肿瘤干细胞.方法:(1)采用无血清悬浮培养方法,从乳腺癌MDA-MB-435细胞中筛选和培养肿瘤干细胞.(2)采用相差显微镜观察含胰岛素和不含胰岛素的无血清培养基中干细胞球形成大小、数量及随时间生长变化情况.(3)采用荧光显微镜观察Hoechst33342染料对MDA-MB-435肿瘤干细胞染色情况.(4)将MDA-MB-435肿瘤干细胞转入有血清培养基培养诱导分化,观察是否能有分化现象.结果:(1)采用无血清悬浮培养方法筛选和培养MDA-MB435肿瘤干细胞成功.(2)发现不含胰岛素的无血清培养基中,形成的肿瘤干细胞团数量多且体积大.(3)随着培养时间延长,肿瘤干细胞球数量逐渐增多,体积逐渐变大.(4) Hoechst33342染料对肿瘤干细胞染色鉴定,约有90％肿瘤干细胞蓝色荧光染料较弱,呈暗淡区.(5) MDA-MB-435肿瘤干细胞经含血清培养基再次培养,具有分化功能.结论:含生长因子的无血清培养基培养MDA-MB-435细胞,可生成肿瘤干细胞球;不含胰岛素的无血清培养基更适合作为筛选肿瘤干细胞的培养基.
目的:探討富集乳腺癌榦細胞的方法,以穫得穩定數量的腫瘤榦細胞.方法:(1)採用無血清懸浮培養方法,從乳腺癌MDA-MB-435細胞中篩選和培養腫瘤榦細胞.(2)採用相差顯微鏡觀察含胰島素和不含胰島素的無血清培養基中榦細胞毬形成大小、數量及隨時間生長變化情況.(3)採用熒光顯微鏡觀察Hoechst33342染料對MDA-MB-435腫瘤榦細胞染色情況.(4)將MDA-MB-435腫瘤榦細胞轉入有血清培養基培養誘導分化,觀察是否能有分化現象.結果:(1)採用無血清懸浮培養方法篩選和培養MDA-MB435腫瘤榦細胞成功.(2)髮現不含胰島素的無血清培養基中,形成的腫瘤榦細胞糰數量多且體積大.(3)隨著培養時間延長,腫瘤榦細胞毬數量逐漸增多,體積逐漸變大.(4) Hoechst33342染料對腫瘤榦細胞染色鑒定,約有90％腫瘤榦細胞藍色熒光染料較弱,呈暗淡區.(5) MDA-MB-435腫瘤榦細胞經含血清培養基再次培養,具有分化功能.結論:含生長因子的無血清培養基培養MDA-MB-435細胞,可生成腫瘤榦細胞毬;不含胰島素的無血清培養基更適閤作為篩選腫瘤榦細胞的培養基.
목적:탐토부집유선암간세포적방법,이획득은정수량적종류간세포.방법:(1)채용무혈청현부배양방법,종유선암MDA-MB-435세포중사선화배양종류간세포.(2)채용상차현미경관찰함이도소화불함이도소적무혈청배양기중간세포구형성대소、수량급수시간생장변화정황.(3)채용형광현미경관찰Hoechst33342염료대MDA-MB-435종류간세포염색정황.(4)장MDA-MB-435종류간세포전입유혈청배양기배양유도분화,관찰시부능유분화현상.결과:(1)채용무혈청현부배양방법사선화배양MDA-MB435종류간세포성공.(2)발현불함이도소적무혈청배양기중,형성적종류간세포단수량다차체적대.(3)수착배양시간연장,종류간세포구수량축점증다,체적축점변대.(4) Hoechst33342염료대종류간세포염색감정,약유90％종류간세포람색형광염료교약,정암담구.(5) MDA-MB-435종류간세포경함혈청배양기재차배양,구유분화공능.결론:함생장인자적무혈청배양기배양MDA-MB-435세포,가생성종류간세포구;불함이도소적무혈청배양기경괄합작위사선종류간세포적배양기.
