CAJ | 학술논문

采用液氮研磨与超声波破碎相结合的方法,破碎不同失水状态的发菜藻体和细胞,用差速离心法制备发菜类囊体膜粗制品,蔗糖密度梯度高速离心纯化类囊体膜,SDS-PAGE电泳分离类囊体膜蛋白,并对膜蛋白进行了MALDI-TOF-TOF/MS质谱分析和鉴定.结果表明:(1)充分吸胀4h后失水6h的发菜(含水量51.2％)和失水24 h的发菜(含水量14.9％),经过多步差速离心后再进行蔗糖密度梯度高速离心,可得到纯化的类囊体膜.(2)发菜类囊体膜蛋白SDS-PAGE电泳分离到14个条带,共鉴定出8种蛋白,根据其功能可分为4类——光合作用相关蛋白(光系统Ⅱ锰稳定蛋白PsbO,F1F0ATP合成酶α亚基和β亚基)、结构域蛋白、选择性通道蛋白OprB、未知蛋白(hypothetical protein Npun_R1321、Npun_R3785、N9414_02186),它们在发菜的光合作用中具有重要作用.
채용액담연마여초성파파쇄상결합적방법,파쇄불동실수상태적발채조체화세포,용차속리심법제비발채류낭체막조제품,자당밀도제도고속리심순화류낭체막,SDS-PAGE전영분리류낭체막단백,병대막단백진행료MALDI-TOF-TOF/MS질보분석화감정.결과표명:(1)충분흡창4h후실수6h적발채(함수량51.2％)화실수24 h적발채(함수량14.9％),경과다보차속리심후재진행자당밀도제도고속리심,가득도순화적류낭체막.(2)발채류낭체막단백SDS-PAGE전영분리도14개조대,공감정출8충단백,근거기공능가분위4류——광합작용상관단백(광계통Ⅱ맹은정단백PsbO,F1F0ATP합성매α아기화β아기)、결구역단백、선택성통도단백OprB、미지단백(hypothetical protein Npun_R1321、Npun_R3785、N9414_02186),타문재발채적광합작용중구유중요작용.