基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2014年
7期
896-903
,共8页
董贺%马艳妮%董磊%赵华路%张俊武%王芳%余佳
董賀%馬豔妮%董磊%趙華路%張俊武%王芳%餘佳
동하%마염니%동뢰%조화로%장준무%왕방%여가
miR-29a%miR-142-3p%髓系分化%基因表达%GO分析
miR-29a%miR-142-3p%髓繫分化%基因錶達%GO分析
miR-29a%miR-142-3p%수계분화%기인표체%GO분석
miR-29a%miR-142-3p%myeloid differentiation%gene expression%GO analysis
目的 深入了解miR-29a/miR-142-3p参与促进髓系分化的调控网络.方法 首先实现miR-29a和miR-142-3p在HL-60细胞中的过表达,同时使用PMA以及ATRA分别诱导HL-60细胞向单核及粒系分化.May-Grünwald-Giemsa染色方法观察核形态变化,Real-time PCR检测细胞内CD11和CD14的表达.mRNA表达谱芯片分析获得表达模式相似的基因,利用DAVID和GeneMANIA进行GO categories和信号通路归类分析.PicTar和TargetScan进行靶基因预测,双荧光报告基因实验确定靶基因的真实性.结果 miR-29a/miR-142-3p过表达细胞与PMA/ATRA诱导分化细胞在整体基因表达模式上有较高的相似度,而表达模式相似的基因大多与细胞分化相关,且在GO分析中显著富集.同时,ZBTB5、CaMKK2、SUV420H2、TRIB2和CANX被确定为miR-29a新的靶基因.结论 miR-29a/miR-142-3p通过调节其靶基因活性,引发整个基因表达调控网络的改变,使之趋向于髓系分化过程中的基因表达变化,从而促进髓系分化进程.
目的 深入瞭解miR-29a/miR-142-3p參與促進髓繫分化的調控網絡.方法 首先實現miR-29a和miR-142-3p在HL-60細胞中的過錶達,同時使用PMA以及ATRA分彆誘導HL-60細胞嚮單覈及粒繫分化.May-Grünwald-Giemsa染色方法觀察覈形態變化,Real-time PCR檢測細胞內CD11和CD14的錶達.mRNA錶達譜芯片分析穫得錶達模式相似的基因,利用DAVID和GeneMANIA進行GO categories和信號通路歸類分析.PicTar和TargetScan進行靶基因預測,雙熒光報告基因實驗確定靶基因的真實性.結果 miR-29a/miR-142-3p過錶達細胞與PMA/ATRA誘導分化細胞在整體基因錶達模式上有較高的相似度,而錶達模式相似的基因大多與細胞分化相關,且在GO分析中顯著富集.同時,ZBTB5、CaMKK2、SUV420H2、TRIB2和CANX被確定為miR-29a新的靶基因.結論 miR-29a/miR-142-3p通過調節其靶基因活性,引髮整箇基因錶達調控網絡的改變,使之趨嚮于髓繫分化過程中的基因錶達變化,從而促進髓繫分化進程.
목적 심입료해miR-29a/miR-142-3p삼여촉진수계분화적조공망락.방법 수선실현miR-29a화miR-142-3p재HL-60세포중적과표체,동시사용PMA이급ATRA분별유도HL-60세포향단핵급립계분화.May-Grünwald-Giemsa염색방법관찰핵형태변화,Real-time PCR검측세포내CD11화CD14적표체.mRNA표체보심편분석획득표체모식상사적기인,이용DAVID화GeneMANIA진행GO categories화신호통로귀류분석.PicTar화TargetScan진행파기인예측,쌍형광보고기인실험학정파기인적진실성.결과 miR-29a/miR-142-3p과표체세포여PMA/ATRA유도분화세포재정체기인표체모식상유교고적상사도,이표체모식상사적기인대다여세포분화상관,차재GO분석중현저부집.동시,ZBTB5、CaMKK2、SUV420H2、TRIB2화CANX피학정위miR-29a신적파기인.결론 miR-29a/miR-142-3p통과조절기파기인활성,인발정개기인표체조공망락적개변,사지추향우수계분화과정중적기인표체변화,종이촉진수계분화진정.