基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2014年
7期
877-881
,共5页
杨红菊%尤列·皮尔曼%维克多·科罗索夫%周向东
楊紅菊%尤列·皮爾曼%維剋多·科囉索伕%週嚮東
양홍국%우렬·피이만%유극다·과라색부%주향동
钙敏感受体%缺氧%黏蛋白%ERK
鈣敏感受體%缺氧%黏蛋白%ERK
개민감수체%결양%점단백%ERK
calcium-sensing receptor%hypoxia%mucin%ERK
目的 探究钙敏感受体(CaSR)在低氧诱导的气道黏液高分泌中的信号通路.方法 低氧培养箱(37℃,94％N2-1％ O2-5％ CO2)培养人气道上皮细胞16HBE复制细胞低氧模型.分为对照组、低氧组、CaSR特异性激动剂CaCl2+低氧组、对照siRNA+低氧组、CaSR-siRNA+低氧组、细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路特异性抑制剂U0126+低氧组.RT-PCR检测黏蛋白(MUC)5AC的转录水平,Western blot检测CaSR、ERK1/2及磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)的蛋白相对含量,ELISA检测MUC5AC的分泌水平,四甲基偶氮唑盐法(MTT)测定细胞的活性.结果 CaSR表达于人气道上皮细胞,转染特异性的CaSR-siRNA明显抑制CaSR的表达.低氧组p-ERK1/2、MUC5 ACmRNA和MUC5AC蛋白的相对含量分别为(0.63±0.11、0.51 ±0.03、0.56±0.07)较对照组(0.27 ±0.04、0.18±0.04、0.25 ±0.06)显著增加(P＜0.05).CaSR的激动剂CaCl2可进一步增强低氧引起的上述作用(P＜0.05),而转染CaSR-siRNA及给予ERK信号通路特异性抑制剂U0126可抑制低氧引起的上述效应(P＜0.05).结论 CaSR可通过MEK/ERK1/2信号通路参与低氧诱导的气道黏液高分泌.
目的 探究鈣敏感受體(CaSR)在低氧誘導的氣道黏液高分泌中的信號通路.方法 低氧培養箱(37℃,94％N2-1％ O2-5％ CO2)培養人氣道上皮細胞16HBE複製細胞低氧模型.分為對照組、低氧組、CaSR特異性激動劑CaCl2+低氧組、對照siRNA+低氧組、CaSR-siRNA+低氧組、細胞外信號調節激酶(ERK)信號通路特異性抑製劑U0126+低氧組.RT-PCR檢測黏蛋白(MUC)5AC的轉錄水平,Western blot檢測CaSR、ERK1/2及燐痠化ERK1/2(p-ERK1/2)的蛋白相對含量,ELISA檢測MUC5AC的分泌水平,四甲基偶氮唑鹽法(MTT)測定細胞的活性.結果 CaSR錶達于人氣道上皮細胞,轉染特異性的CaSR-siRNA明顯抑製CaSR的錶達.低氧組p-ERK1/2、MUC5 ACmRNA和MUC5AC蛋白的相對含量分彆為(0.63±0.11、0.51 ±0.03、0.56±0.07)較對照組(0.27 ±0.04、0.18±0.04、0.25 ±0.06)顯著增加(P＜0.05).CaSR的激動劑CaCl2可進一步增彊低氧引起的上述作用(P＜0.05),而轉染CaSR-siRNA及給予ERK信號通路特異性抑製劑U0126可抑製低氧引起的上述效應(P＜0.05).結論 CaSR可通過MEK/ERK1/2信號通路參與低氧誘導的氣道黏液高分泌.
목적 탐구개민감수체(CaSR)재저양유도적기도점액고분비중적신호통로.방법 저양배양상(37℃,94％N2-1％ O2-5％ CO2)배양인기도상피세포16HBE복제세포저양모형.분위대조조、저양조、CaSR특이성격동제CaCl2+저양조、대조siRNA+저양조、CaSR-siRNA+저양조、세포외신호조절격매(ERK)신호통로특이성억제제U0126+저양조.RT-PCR검측점단백(MUC)5AC적전록수평,Western blot검측CaSR、ERK1/2급린산화ERK1/2(p-ERK1/2)적단백상대함량,ELISA검측MUC5AC적분비수평,사갑기우담서염법(MTT)측정세포적활성.결과 CaSR표체우인기도상피세포,전염특이성적CaSR-siRNA명현억제CaSR적표체.저양조p-ERK1/2、MUC5 ACmRNA화MUC5AC단백적상대함량분별위(0.63±0.11、0.51 ±0.03、0.56±0.07)교대조조(0.27 ±0.04、0.18±0.04、0.25 ±0.06)현저증가(P＜0.05).CaSR적격동제CaCl2가진일보증강저양인기적상술작용(P＜0.05),이전염CaSR-siRNA급급여ERK신호통로특이성억제제U0126가억제저양인기적상술효응(P＜0.05).결론 CaSR가통과MEK/ERK1/2신호통로삼여저양유도적기도점액고분비.
