微生物与感染
微生物與感染
미생물여감염
JOURNAL OF MICROBES AND INFECTION
2014年
3期
139-146
,共8页
常晓月%朱嗣博%高学鹏%朱玮%朱乃硕
常曉月%硃嗣博%高學鵬%硃瑋%硃迺碩
상효월%주사박%고학붕%주위%주내석
双向荧光差异凝胶电泳%分子标记%乙型肝炎病毒疫苗%血清%免疫不应答
雙嚮熒光差異凝膠電泳%分子標記%乙型肝炎病毒疫苗%血清%免疫不應答
쌍향형광차이응효전영%분자표기%을형간염병독역묘%혈청%면역불응답
Two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis%Molecular marker%Hepatitis B virus vaccine%Serum%Immune unresponsiveness
以往研究显示,人群中约有10％无法通过接种乙型肝炎病毒(HBV)疫苗而产生保护性水平的应答.为研究HBV疫苗免疫后不应答发生的机制,本研究对108例经正常免疫程序(大连汉信产HBV疫苗,10μg/支,共接种3针)后不同应答水平人群的血浆蛋白质组差异进行分析,将其分为无应答(抗体效价检测结果为阴性)组和高应答(抗体效价约1 000 mIU/ml)组.用多重亲和去除系统(MARS)亲和柱去除14种高丰度蛋白后,采用双向荧光差异电泳(2D-DIGE)与基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)相结合的方法,鉴定获得11种差异表达蛋白质.在这些差异表达蛋白质中,α1微球蛋白、激肽原1的表达在无应答人群中较高应答人群上调,而α1抗胰凝乳蛋白酶、维生素D结合蛋白、afamin、抗凝血酶Ⅲ和玻连蛋白表达下调.其中,α1抗胰凝乳蛋白酶、激肽原1和α1微球蛋白的差异性表达进一步得到酶联免疫吸附试验(ELISA)或蛋白免疫印迹法验证.以上蛋白质的表达情况与HBV疫苗免疫应答状况相关,可能成为检测HBV疫苗免疫应答水平的分子标记,为进一步研究免疫不应答机制奠定基础.
以往研究顯示,人群中約有10％無法通過接種乙型肝炎病毒(HBV)疫苗而產生保護性水平的應答.為研究HBV疫苗免疫後不應答髮生的機製,本研究對108例經正常免疫程序(大連漢信產HBV疫苗,10μg/支,共接種3針)後不同應答水平人群的血漿蛋白質組差異進行分析,將其分為無應答(抗體效價檢測結果為陰性)組和高應答(抗體效價約1 000 mIU/ml)組.用多重親和去除繫統(MARS)親和柱去除14種高豐度蛋白後,採用雙嚮熒光差異電泳(2D-DIGE)與基質輔助激光解析電離串聯飛行時間質譜(MALDI-TOF-MS)相結閤的方法,鑒定穫得11種差異錶達蛋白質.在這些差異錶達蛋白質中,α1微毬蛋白、激肽原1的錶達在無應答人群中較高應答人群上調,而α1抗胰凝乳蛋白酶、維生素D結閤蛋白、afamin、抗凝血酶Ⅲ和玻連蛋白錶達下調.其中,α1抗胰凝乳蛋白酶、激肽原1和α1微毬蛋白的差異性錶達進一步得到酶聯免疫吸附試驗(ELISA)或蛋白免疫印跡法驗證.以上蛋白質的錶達情況與HBV疫苗免疫應答狀況相關,可能成為檢測HBV疫苗免疫應答水平的分子標記,為進一步研究免疫不應答機製奠定基礎.
이왕연구현시,인군중약유10％무법통과접충을형간염병독(HBV)역묘이산생보호성수평적응답.위연구HBV역묘면역후불응답발생적궤제,본연구대108례경정상면역정서(대련한신산HBV역묘,10μg/지,공접충3침)후불동응답수평인군적혈장단백질조차이진행분석,장기분위무응답(항체효개검측결과위음성)조화고응답(항체효개약1 000 mIU/ml)조.용다중친화거제계통(MARS)친화주거제14충고봉도단백후,채용쌍향형광차이전영(2D-DIGE)여기질보조격광해석전리천련비행시간질보(MALDI-TOF-MS)상결합적방법,감정획득11충차이표체단백질.재저사차이표체단백질중,α1미구단백、격태원1적표체재무응답인군중교고응답인군상조,이α1항이응유단백매、유생소D결합단백、afamin、항응혈매Ⅲ화파련단백표체하조.기중,α1항이응유단백매、격태원1화α1미구단백적차이성표체진일보득도매련면역흡부시험(ELISA)혹단백면역인적법험증.이상단백질적표체정황여HBV역묘면역응답상황상관,가능성위검측HBV역묘면역응답수평적분자표기,위진일보연구면역불응답궤제전정기출.
