西南农业学报
西南農業學報
서남농업학보
SOUTHWEST CHINA JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
4期
1547-1550
,共4页
卢训%方琦%尹跃艳%秦西云%丁铭
盧訓%方琦%尹躍豔%秦西雲%丁銘
로훈%방기%윤약염%진서운%정명
烟草花叶病毒%原核表达%多克隆抗体%DOT-ELISA
煙草花葉病毒%原覈錶達%多剋隆抗體%DOT-ELISA
연초화협병독%원핵표체%다극륭항체%DOT-ELISA
Tobacco mosaic virus%Prokaryotic expression%Polyclonal antibody%DOT-ELISA
用RT-PCR从感染烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的烟草样品中克隆该病毒的外壳蛋白基因,病毒外壳蛋白基因再亚克隆到原核表达载体pET-30a(+)中,构建成重组原核表达载体,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导、Ni+ NTA亲和柱纯化获重组蛋白.以纯化的重组蛋白为抗原免疫家兔,制备TMV外壳蛋白多克隆抗体,并用制备的多克隆抗体建立了更简便、经济、特异性更强的DOT-ELISA检测法.
用RT-PCR從感染煙草花葉病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的煙草樣品中剋隆該病毒的外殼蛋白基因,病毒外殼蛋白基因再亞剋隆到原覈錶達載體pET-30a(+)中,構建成重組原覈錶達載體,轉化大腸桿菌BL21,經IPTG誘導、Ni+ NTA親和柱純化穫重組蛋白.以純化的重組蛋白為抗原免疫傢兔,製備TMV外殼蛋白多剋隆抗體,併用製備的多剋隆抗體建立瞭更簡便、經濟、特異性更彊的DOT-ELISA檢測法.
용RT-PCR종감염연초화협병독(Tobacco mosaic virus,TMV)적연초양품중극륭해병독적외각단백기인,병독외각단백기인재아극륭도원핵표체재체pET-30a(+)중,구건성중조원핵표체재체,전화대장간균BL21,경IPTG유도、Ni+ NTA친화주순화획중조단백.이순화적중조단백위항원면역가토,제비TMV외각단백다극륭항체,병용제비적다극륭항체건립료경간편、경제、특이성경강적DOT-ELISA검측법.
