实用口腔医学杂志
實用口腔醫學雜誌
실용구강의학잡지
JOURNAL OF PRACTICAL STOMATOLOGY
2014年
3期
311-316
,共6页
孙津龙%明磊国%沈丽娟%金岩%陈吉华
孫津龍%明磊國%瀋麗娟%金巖%陳吉華
손진룡%명뢰국%침려연%금암%진길화
Bax channel blocker(BCB)%衰老%成骨分化%骨髓间充质干细胞
Bax channel blocker(BCB)%衰老%成骨分化%骨髓間充質榦細胞
Bax channel blocker(BCB)%쇠로%성골분화%골수간충질간세포
Bax channel blocker(BCB)%Aging%Osteogenesis differentiation%BMSC
目的:探讨Bax channel blocker(BCB)对自然衰老大鼠骨髓间充质干细胞(aged-BMSCs)生物学功能的影响.方法:全骨髓贴壁培养法获得22月龄(老年)和2周龄(年青)大鼠BMSCs,β-gal染色鉴定aged-BMSCs,用BCB对实验组细胞进行干预,以Nanog和Oct-4为靶标,RT-PCR筛选最佳作用浓度.使用RT-PCR和Western Blot分别检测细胞衰老水平及成骨分化的关键基因及蛋白的表达;对细胞药物干预同时进行成骨分化诱导,培养14 d后进行碱性磷酸酶(ALP)染色,21 d后茜素红染色.结果:BCB对aged-BMSCs最佳实验浓度为10 μmol/L.BCB能明显降低aged-BMSCs细胞内β-gal含量,在mRNA水平和蛋白水平降低衰老相关基因p53和p21WAF1/cip1表达;明显提升干细胞标记物Nanog、Oct-4.成骨分化诱导后,成骨分化标志基因表达上调,ALP和茜素红染色水平提升.结论:BCB能够逆转aged-BMSCs的衰老,促进其骨向分化.
目的:探討Bax channel blocker(BCB)對自然衰老大鼠骨髓間充質榦細胞(aged-BMSCs)生物學功能的影響.方法:全骨髓貼壁培養法穫得22月齡(老年)和2週齡(年青)大鼠BMSCs,β-gal染色鑒定aged-BMSCs,用BCB對實驗組細胞進行榦預,以Nanog和Oct-4為靶標,RT-PCR篩選最佳作用濃度.使用RT-PCR和Western Blot分彆檢測細胞衰老水平及成骨分化的關鍵基因及蛋白的錶達;對細胞藥物榦預同時進行成骨分化誘導,培養14 d後進行堿性燐痠酶(ALP)染色,21 d後茜素紅染色.結果:BCB對aged-BMSCs最佳實驗濃度為10 μmol/L.BCB能明顯降低aged-BMSCs細胞內β-gal含量,在mRNA水平和蛋白水平降低衰老相關基因p53和p21WAF1/cip1錶達;明顯提升榦細胞標記物Nanog、Oct-4.成骨分化誘導後,成骨分化標誌基因錶達上調,ALP和茜素紅染色水平提升.結論:BCB能夠逆轉aged-BMSCs的衰老,促進其骨嚮分化.
목적:탐토Bax channel blocker(BCB)대자연쇠로대서골수간충질간세포(aged-BMSCs)생물학공능적영향.방법:전골수첩벽배양법획득22월령(노년)화2주령(년청)대서BMSCs,β-gal염색감정aged-BMSCs,용BCB대실험조세포진행간예,이Nanog화Oct-4위파표,RT-PCR사선최가작용농도.사용RT-PCR화Western Blot분별검측세포쇠로수평급성골분화적관건기인급단백적표체;대세포약물간예동시진행성골분화유도,배양14 d후진행감성린산매(ALP)염색,21 d후천소홍염색.결과:BCB대aged-BMSCs최가실험농도위10 μmol/L.BCB능명현강저aged-BMSCs세포내β-gal함량,재mRNA수평화단백수평강저쇠로상관기인p53화p21WAF1/cip1표체;명현제승간세포표기물Nanog、Oct-4.성골분화유도후,성골분화표지기인표체상조,ALP화천소홍염색수평제승.결론:BCB능구역전aged-BMSCs적쇠로,촉진기골향분화.