棉花学报
棉花學報
면화학보
COTTON SCIENCE
2014年
3期
213-220
,共8页
马玲玲%魏延宏%何兰兰%柴蒙亮%朱华国%孙杰%张薇
馬玲玲%魏延宏%何蘭蘭%柴矇亮%硃華國%孫傑%張薇
마령령%위연굉%하란란%시몽량%주화국%손걸%장미
海岛棉%基因枪法%茎尖%遗传转化
海島棉%基因鎗法%莖尖%遺傳轉化
해도면%기인창법%경첨%유전전화
Gossypium barbadense L.%biolistics transformation%apical meristem%genetic transformation
以新疆海岛棉品种新海13号的茎尖为转化受体,采用基因枪介导法,研究DNA包裹浓度、微载体种类、前渗处理时间、轰击条件、筛选方法等对茎尖转化的影响,建立了基因枪法介导的海岛棉茎尖转化体系.研究结果表明,采用1.5μg· μL-1的质粒DNA包裹1.0 μm金粉微载体,前渗处理12h,轰击压力为7.584 MPa(11 00 psi),轰击距离为6 cm,后渗处理16h,恢复处理24 h,在120 mg·L-1卡那霉素浓度下直接筛选35 d.在添加4 g·L-1活性炭粒的生根培养基中诱导抗性幼苗生根,获得抗性再生植株.通过PCR和RT-PCR检测,共得到5株转抗除草剂基因EPSPS的阳性植株.该研究体系的建立为海岛棉的遗传转化奠定了基础,为海岛棉的育种工作提供了材料.
以新疆海島棉品種新海13號的莖尖為轉化受體,採用基因鎗介導法,研究DNA包裹濃度、微載體種類、前滲處理時間、轟擊條件、篩選方法等對莖尖轉化的影響,建立瞭基因鎗法介導的海島棉莖尖轉化體繫.研究結果錶明,採用1.5μg· μL-1的質粒DNA包裹1.0 μm金粉微載體,前滲處理12h,轟擊壓力為7.584 MPa(11 00 psi),轟擊距離為6 cm,後滲處理16h,恢複處理24 h,在120 mg·L-1卡那黴素濃度下直接篩選35 d.在添加4 g·L-1活性炭粒的生根培養基中誘導抗性幼苗生根,穫得抗性再生植株.通過PCR和RT-PCR檢測,共得到5株轉抗除草劑基因EPSPS的暘性植株.該研究體繫的建立為海島棉的遺傳轉化奠定瞭基礎,為海島棉的育種工作提供瞭材料.
이신강해도면품충신해13호적경첨위전화수체,채용기인창개도법,연구DNA포과농도、미재체충류、전삼처리시간、굉격조건、사선방법등대경첨전화적영향,건립료기인창법개도적해도면경첨전화체계.연구결과표명,채용1.5μg· μL-1적질립DNA포과1.0 μm금분미재체,전삼처리12h,굉격압력위7.584 MPa(11 00 psi),굉격거리위6 cm,후삼처리16h,회복처리24 h,재120 mg·L-1잡나매소농도하직접사선35 d.재첨가4 g·L-1활성탄립적생근배양기중유도항성유묘생근,획득항성재생식주.통과PCR화RT-PCR검측,공득도5주전항제초제기인EPSPS적양성식주.해연구체계적건립위해도면적유전전화전정료기출,위해도면적육충공작제공료재료.
