中国实验方剂学杂志
中國實驗方劑學雜誌
중국실험방제학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL TRADITIONAL MEDICAL FORMULAE
2014年
8期
133-136
,共4页
郑堰心%张丽%邓虹珠%梁磊
鄭堰心%張麗%鄧虹珠%樑磊
정언심%장려%산홍주%량뢰
槐定碱%苦参碱%苦豆碱%结肠上皮细胞%细胞炎症模型
槐定堿%苦參堿%苦豆堿%結腸上皮細胞%細胞炎癥模型
괴정감%고삼감%고두감%결장상피세포%세포염증모형
sophoridine%matrine%aloperine%IEC-6 cells%inflammation
目的:构建结肠上皮细胞炎症模型,探讨槐定碱、苦参碱和苦豆碱对细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响.方法:将细胞接种12孔板中,每孔接种肠上皮细胞株IEC-62×105个细胞.细菌脂多糖(LPS,1mg·L-1)干预生长良好的IEC-6细胞12 h,建立细胞炎症模型.四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测3种生物碱不同浓度对炎症细胞增殖的影响;ELISA法检测给药后细胞上清中IL-6,TNF-α的变化;免疫印迹法检测细胞内IL-6及TNF-α蛋白表达水平.结果:与正常组比较,模型组细胞上清中IL-6,TNF-α水平显著升高,LPS(1 mg·L-1)干预12 h后,IL-6,TNF-α含量分别为(1 899.68±45.80),(148.67 ±5.93) ng·L-1.苦豆碱、槐定碱和苦参碱均可有效减弱LPS诱导的结肠上皮细胞损伤.当生物碱浓度为100μmol· L-1时,槐定碱、苦参碱和苦豆碱均可提高LPS损伤细胞的活性,细胞存活率分别从80.47%提高为91.96%,92.40%,97.23%.此外,这3种生物碱可降低IL-6和TNF-α的含量及其在细胞内的表达.结论:槐定碱、苦参碱和苦豆碱3种生物碱均可通过降低IL-6和TNF-α活性发挥抗炎作用.其中,苦豆碱的抗炎作用最佳.
目的:構建結腸上皮細胞炎癥模型,探討槐定堿、苦參堿和苦豆堿對細胞因子白細胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)錶達的影響.方法:將細胞接種12孔闆中,每孔接種腸上皮細胞株IEC-62×105箇細胞.細菌脂多糖(LPS,1mg·L-1)榦預生長良好的IEC-6細胞12 h,建立細胞炎癥模型.四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測3種生物堿不同濃度對炎癥細胞增殖的影響;ELISA法檢測給藥後細胞上清中IL-6,TNF-α的變化;免疫印跡法檢測細胞內IL-6及TNF-α蛋白錶達水平.結果:與正常組比較,模型組細胞上清中IL-6,TNF-α水平顯著升高,LPS(1 mg·L-1)榦預12 h後,IL-6,TNF-α含量分彆為(1 899.68±45.80),(148.67 ±5.93) ng·L-1.苦豆堿、槐定堿和苦參堿均可有效減弱LPS誘導的結腸上皮細胞損傷.噹生物堿濃度為100μmol· L-1時,槐定堿、苦參堿和苦豆堿均可提高LPS損傷細胞的活性,細胞存活率分彆從80.47%提高為91.96%,92.40%,97.23%.此外,這3種生物堿可降低IL-6和TNF-α的含量及其在細胞內的錶達.結論:槐定堿、苦參堿和苦豆堿3種生物堿均可通過降低IL-6和TNF-α活性髮揮抗炎作用.其中,苦豆堿的抗炎作用最佳.
목적:구건결장상피세포염증모형,탐토괴정감、고삼감화고두감대세포인자백세포개소-6(IL-6)、종류배사인자-α(TNF-α)표체적영향.방법:장세포접충12공판중,매공접충장상피세포주IEC-62×105개세포.세균지다당(LPS,1mg·L-1)간예생장량호적IEC-6세포12 h,건립세포염증모형.사갑기우담서염(MTT)법검측3충생물감불동농도대염증세포증식적영향;ELISA법검측급약후세포상청중IL-6,TNF-α적변화;면역인적법검측세포내IL-6급TNF-α단백표체수평.결과:여정상조비교,모형조세포상청중IL-6,TNF-α수평현저승고,LPS(1 mg·L-1)간예12 h후,IL-6,TNF-α함량분별위(1 899.68±45.80),(148.67 ±5.93) ng·L-1.고두감、괴정감화고삼감균가유효감약LPS유도적결장상피세포손상.당생물감농도위100μmol· L-1시,괴정감、고삼감화고두감균가제고LPS손상세포적활성,세포존활솔분별종80.47%제고위91.96%,92.40%,97.23%.차외,저3충생물감가강저IL-6화TNF-α적함량급기재세포내적표체.결론:괴정감、고삼감화고두감3충생물감균가통과강저IL-6화TNF-α활성발휘항염작용.기중,고두감적항염작용최가.