江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
2期
417-422
,共6页
祭芳%曹欢%徐剑宏%史建荣
祭芳%曹歡%徐劍宏%史建榮
제방%조환%서검굉%사건영
玉米赤霉烯酮%单克隆抗体%酶联免疫吸附法
玉米赤黴烯酮%單剋隆抗體%酶聯免疫吸附法
옥미적매희동%단극륭항체%매련면역흡부법
zearalenone%monoclonal antibody%enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)
为建立快速、简单、灵敏、有效的玉米赤霉烯酮的检测方法,将玉米赤霉烯酮与羧甲氧基胺半盐酸盐反应,合成半抗原ZEN-oxime,通过活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联制备玉米赤霉烯酮人工抗原,以人工抗原ZEN-BSA免疫BALB/C小鼠,取该鼠脾细胞与SP 2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选和克隆,得到了1株能稳定分泌抗玉米赤霉烯酮抗体的单克隆细胞株3D10.3D10的抗体类型及亚类均为IgM,其轻链为Kappa链.制备的单克隆抗体腹水通过间接酶联免疫吸附测定,效价在1×10-6以上.该单克隆抗体对玉米赤霉烯酮的IC50为225 ng/ml,除与玉米赤霉烯酮结构类似物有一定的交叉反应外,与其他参试真菌毒素均无交叉反应.所制备的单克隆抗体可用于玉米赤霉烯酮毒素初筛和定性检测.
為建立快速、簡單、靈敏、有效的玉米赤黴烯酮的檢測方法,將玉米赤黴烯酮與羧甲氧基胺半鹽痠鹽反應,閤成半抗原ZEN-oxime,通過活潑酯法將半抗原與載體蛋白偶聯製備玉米赤黴烯酮人工抗原,以人工抗原ZEN-BSA免疫BALB/C小鼠,取該鼠脾細胞與SP 2/0鼠骨髓瘤細胞融閤,經篩選和剋隆,得到瞭1株能穩定分泌抗玉米赤黴烯酮抗體的單剋隆細胞株3D10.3D10的抗體類型及亞類均為IgM,其輕鏈為Kappa鏈.製備的單剋隆抗體腹水通過間接酶聯免疫吸附測定,效價在1×10-6以上.該單剋隆抗體對玉米赤黴烯酮的IC50為225 ng/ml,除與玉米赤黴烯酮結構類似物有一定的交扠反應外,與其他參試真菌毒素均無交扠反應.所製備的單剋隆抗體可用于玉米赤黴烯酮毒素初篩和定性檢測.
위건립쾌속、간단、령민、유효적옥미적매희동적검측방법,장옥미적매희동여최갑양기알반염산염반응,합성반항원ZEN-oxime,통과활발지법장반항원여재체단백우련제비옥미적매희동인공항원,이인공항원ZEN-BSA면역BALB/C소서,취해서비세포여SP 2/0서골수류세포융합,경사선화극륭,득도료1주능은정분비항옥미적매희동항체적단극륭세포주3D10.3D10적항체류형급아류균위IgM,기경련위Kappa련.제비적단극륭항체복수통과간접매련면역흡부측정,효개재1×10-6이상.해단극륭항체대옥미적매희동적IC50위225 ng/ml,제여옥미적매희동결구유사물유일정적교차반응외,여기타삼시진균독소균무교차반응.소제비적단극륭항체가용우옥미적매희동독소초사화정성검측.
