实用预防医学
實用預防醫學
실용예방의학
PRACTICAL PREVENTIVE MEDICINE
2014年
4期
385-387
,共3页
魏传杰%肖双%夏炎%龙鼎新
魏傳傑%肖雙%夏炎%龍鼎新
위전걸%초쌍%하염%룡정신
Atg7%RNA干扰%pGenesil-1%自噬%载体构建
Atg7%RNA榦擾%pGenesil-1%自噬%載體構建
Atg7%RNA간우%pGenesil-1%자서%재체구건
Atg7%RNA interference%pGenesil-1%Autophagy%Vector construction
目的 利用RNA干扰技术,构建pGenesil-1质粒载体介导靶向自噬基因Atg7的shRNA真核表达载体. 方法 根据GenBank中Atg7基因的cDNA序列(NM 001136031),设计有小发卡结构的三条寡核苷酸序列,连接到空载体pGenesil-1中,转化到JM109菌株,选取阳性克隆,进行酶切鉴定和DNA测序分析. 结果 经双酶切结果显示合成的shRNA序列成功连接到pGenesil-1质粒载体中,DNA测序结果证实干扰序列和目的序列相同,重组载体pGenesil-1-Atg7-shRNA构建成功. 结论 成功构建干扰人Atg7基因的重组表达载体,为研究Atg7蛋白的生物学功能提供了研究基础.
目的 利用RNA榦擾技術,構建pGenesil-1質粒載體介導靶嚮自噬基因Atg7的shRNA真覈錶達載體. 方法 根據GenBank中Atg7基因的cDNA序列(NM 001136031),設計有小髮卡結構的三條寡覈苷痠序列,連接到空載體pGenesil-1中,轉化到JM109菌株,選取暘性剋隆,進行酶切鑒定和DNA測序分析. 結果 經雙酶切結果顯示閤成的shRNA序列成功連接到pGenesil-1質粒載體中,DNA測序結果證實榦擾序列和目的序列相同,重組載體pGenesil-1-Atg7-shRNA構建成功. 結論 成功構建榦擾人Atg7基因的重組錶達載體,為研究Atg7蛋白的生物學功能提供瞭研究基礎.
목적 이용RNA간우기술,구건pGenesil-1질립재체개도파향자서기인Atg7적shRNA진핵표체재체. 방법 근거GenBank중Atg7기인적cDNA서렬(NM 001136031),설계유소발잡결구적삼조과핵감산서렬,련접도공재체pGenesil-1중,전화도JM109균주,선취양성극륭,진행매절감정화DNA측서분석. 결과 경쌍매절결과현시합성적shRNA서렬성공련접도pGenesil-1질립재체중,DNA측서결과증실간우서렬화목적서렬상동,중조재체pGenesil-1-Atg7-shRNA구건성공. 결론 성공구건간우인Atg7기인적중조표체재체,위연구Atg7단백적생물학공능제공료연구기출.
