中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2014年
4期
314-317
,共4页
赵鑫%张鑫%时红艳%陈建飞%迟延彬%韩斆%李长龙%刘宁%胡桂学
趙鑫%張鑫%時紅豔%陳建飛%遲延彬%韓斆%李長龍%劉寧%鬍桂學
조흠%장흠%시홍염%진건비%지연빈%한효%리장룡%류저%호계학
猪传染性胃肠炎病毒%重组核蛋白%单克隆抗体%抗原表位
豬傳染性胃腸炎病毒%重組覈蛋白%單剋隆抗體%抗原錶位
저전염성위장염병독%중조핵단백%단극륭항체%항원표위
TGEV%recombinant nucleoprotein%monoclonal antibody%antigenic epitope
为制备抗猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)N蛋白的单克隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究利用原核表达系统表达重组N蛋白,纯化后免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与骨髓瘤细胞融合,通过间接ELISA方法筛选阳性克隆,经4次细胞克隆纯化后,获得两株稳定分泌抗重组TGEV N蛋白的MAb,命名为3D7和5E8.通过western blot和间接免疫荧光试验对MAb的免疫活性和特异性进行鉴定,结果表明两株MAb均能够与TGEV全病毒反应并且特异性良好.利用合成的多肽对N蛋白抗原表位进行鉴定,初步确定MAb3D7识别的表位为241AGKGDVTRFYGARSS SANFG260;5E8为184KKDD SVEQAVLAALKKLGV203.本研究制备了两株MAb并对其表位进行鉴定,为TGEV检测方法的建立和N蛋白功能的分析奠定了基础.
為製備抗豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)N蛋白的單剋隆抗體(MAb)及鑒定其抗原錶位,本研究利用原覈錶達繫統錶達重組N蛋白,純化後免疫BALB/c小鼠,將其脾細胞與骨髓瘤細胞融閤,通過間接ELISA方法篩選暘性剋隆,經4次細胞剋隆純化後,穫得兩株穩定分泌抗重組TGEV N蛋白的MAb,命名為3D7和5E8.通過western blot和間接免疫熒光試驗對MAb的免疫活性和特異性進行鑒定,結果錶明兩株MAb均能夠與TGEV全病毒反應併且特異性良好.利用閤成的多肽對N蛋白抗原錶位進行鑒定,初步確定MAb3D7識彆的錶位為241AGKGDVTRFYGARSS SANFG260;5E8為184KKDD SVEQAVLAALKKLGV203.本研究製備瞭兩株MAb併對其錶位進行鑒定,為TGEV檢測方法的建立和N蛋白功能的分析奠定瞭基礎.
위제비항저전염성위장염병독(TGEV)N단백적단극륭항체(MAb)급감정기항원표위,본연구이용원핵표체계통표체중조N단백,순화후면역BALB/c소서,장기비세포여골수류세포융합,통과간접ELISA방법사선양성극륭,경4차세포극륭순화후,획득량주은정분비항중조TGEV N단백적MAb,명명위3D7화5E8.통과western blot화간접면역형광시험대MAb적면역활성화특이성진행감정,결과표명량주MAb균능구여TGEV전병독반응병차특이성량호.이용합성적다태대N단백항원표위진행감정,초보학정MAb3D7식별적표위위241AGKGDVTRFYGARSS SANFG260;5E8위184KKDD SVEQAVLAALKKLGV203.본연구제비료량주MAb병대기표위진행감정,위TGEV검측방법적건립화N단백공능적분석전정료기출.
