中国兽医杂志
中國獸醫雜誌
중국수의잡지
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE
2014年
3期
3-5,9
,共4页
张鑫宇%陈宇%刘文俊%夏晓莉%孙怀昌
張鑫宇%陳宇%劉文俊%夏曉莉%孫懷昌
장흠우%진우%류문준%하효리%손부창
非洲猪瘟病毒%重组蛋白%诊断抗原
非洲豬瘟病毒%重組蛋白%診斷抗原
비주저온병독%중조단백%진단항원
为了获得非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)重组蛋白pK205R、pE183L、pA104R和pB602L,将Ba71V株的K205R、E183L、A104R和B602L基因分别亚克隆进行原核表达载体pET30a(+),构建重组质粒pET-E183L、pET-B602L、pET-K205R和pET-A104R,转化大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3).IPTG诱导后,纯化表达的蛋白,并进行Western blotting鉴定,结果4种重组蛋白与预期大小一致,且与ASFV抗体发生特异性反应.为了从表达的4种重组蛋白中筛选最佳诊断抗原,将其分别包被酶标板,间接ELISA检测ASFV阳性血清,发现重组蛋白pK205R、p54和pB602L血清学反应良好;在检测ASFV感染后第13天分离血清时,重组蛋白p54和pK205R效果更佳,这表明p54和pK205R重组蛋白是较好的诊断抗原,可用于ASFV感染后早期或中后期血清学诊断.
為瞭穫得非洲豬瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)重組蛋白pK205R、pE183L、pA104R和pB602L,將Ba71V株的K205R、E183L、A104R和B602L基因分彆亞剋隆進行原覈錶達載體pET30a(+),構建重組質粒pET-E183L、pET-B602L、pET-K205R和pET-A104R,轉化大腸桿菌感受態細胞BL21(DE3).IPTG誘導後,純化錶達的蛋白,併進行Western blotting鑒定,結果4種重組蛋白與預期大小一緻,且與ASFV抗體髮生特異性反應.為瞭從錶達的4種重組蛋白中篩選最佳診斷抗原,將其分彆包被酶標闆,間接ELISA檢測ASFV暘性血清,髮現重組蛋白pK205R、p54和pB602L血清學反應良好;在檢測ASFV感染後第13天分離血清時,重組蛋白p54和pK205R效果更佳,這錶明p54和pK205R重組蛋白是較好的診斷抗原,可用于ASFV感染後早期或中後期血清學診斷.
위료획득비주저온병독(African swine fever virus,ASFV)중조단백pK205R、pE183L、pA104R화pB602L,장Ba71V주적K205R、E183L、A104R화B602L기인분별아극륭진행원핵표체재체pET30a(+),구건중조질립pET-E183L、pET-B602L、pET-K205R화pET-A104R,전화대장간균감수태세포BL21(DE3).IPTG유도후,순화표체적단백,병진행Western blotting감정,결과4충중조단백여예기대소일치,차여ASFV항체발생특이성반응.위료종표체적4충중조단백중사선최가진단항원,장기분별포피매표판,간접ELISA검측ASFV양성혈청,발현중조단백pK205R、p54화pB602L혈청학반응량호;재검측ASFV감염후제13천분리혈청시,중조단백p54화pK205R효과경가,저표명p54화pK205R중조단백시교호적진단항원,가용우ASFV감염후조기혹중후기혈청학진단.
