蚌埠医学院学报
蚌埠醫學院學報
방부의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE BENGBU
2014年
3期
288-290,294
,共4页
曹元应%房功思%孟德娣%汪学龙
曹元應%房功思%孟德娣%汪學龍
조원응%방공사%맹덕제%왕학룡
结核分枝杆菌%重组抗原%真核表达载体
結覈分枝桿菌%重組抗原%真覈錶達載體
결핵분지간균%중조항원%진핵표체재체
Mycobacterium tuberculosis%recombinant antigen%eukaryotic expression vector
目的:建立结核分枝杆菌PPE68蛋白基因重组质粒的真核表达载体,为以后对PPE重组蛋白的免疫原性分析奠定基础.方法:提取结核分枝杆菌总DNA,PCR法扩增出PPE68编码基因,通过线性T克隆载体pGEM-T连接,亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)后,转染至HeLa细胞中表达,Western blot鉴定表达产物.结果:PCR产物、pGEM-T-PPE68及pcDNA3.1(+)-PPE68分别经双酶切后均获得同一大小基因片段,表达产物经Western blot鉴定相对分子质量约为40 000.结论:成功构建了结核分枝杆菌PPE68基因真核表达载体,并获得了表达产物.
目的:建立結覈分枝桿菌PPE68蛋白基因重組質粒的真覈錶達載體,為以後對PPE重組蛋白的免疫原性分析奠定基礎.方法:提取結覈分枝桿菌總DNA,PCR法擴增齣PPE68編碼基因,通過線性T剋隆載體pGEM-T連接,亞剋隆至真覈錶達載體pcDNA3.1(+)後,轉染至HeLa細胞中錶達,Western blot鑒定錶達產物.結果:PCR產物、pGEM-T-PPE68及pcDNA3.1(+)-PPE68分彆經雙酶切後均穫得同一大小基因片段,錶達產物經Western blot鑒定相對分子質量約為40 000.結論:成功構建瞭結覈分枝桿菌PPE68基因真覈錶達載體,併穫得瞭錶達產物.
목적:건립결핵분지간균PPE68단백기인중조질립적진핵표체재체,위이후대PPE중조단백적면역원성분석전정기출.방법:제취결핵분지간균총DNA,PCR법확증출PPE68편마기인,통과선성T극륭재체pGEM-T련접,아극륭지진핵표체재체pcDNA3.1(+)후,전염지HeLa세포중표체,Western blot감정표체산물.결과:PCR산물、pGEM-T-PPE68급pcDNA3.1(+)-PPE68분별경쌍매절후균획득동일대소기인편단,표체산물경Western blot감정상대분자질량약위40 000.결론:성공구건료결핵분지간균PPE68기인진핵표체재체,병획득료표체산물.
