人FAM172A基因慢病毒载体的构建及其在巨噬细胞中的表达
인FAM172A기인만병독재체적구건급기재거서세포중적표체
Construction of the Lentivirus Vector of Human FAM172A Gene and Its Expression in Human Macrophages
  • 万方数据
    医学研究杂志 의학연구잡지
    JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
    2014年 4期 25-29 ,共5页

    李梅芳%张蓉%李连喜%俞立波%屠印芳%陆俊茜%包玉倩%贾伟平

    리매방%장용%리련희%유립파%도인방%륙준천%포옥천%가위평

    FAM172A基因%慢病毒载体%巨噬细胞 FAM172A基因%慢病毒載體%巨噬細胞
    FAM172A기인%만병독재체%거서세포
    FAM172A gene%lentivirus vetor%Macrophages
    目的 构建人FAM172A基因慢病毒载体,并包装慢病毒FAM172A感染人巨噬细胞予以鉴定.方法 以PDC315-FAM172A为模板扩增FAM172A基因全长序列后,与慢病毒载体pLenti6.3/V5-GFP经酶切、连接转化大肠杆菌,挑取阳性克隆,行菌液PCR、酶切及测序鉴定.将鉴定正确的FAM172A基因慢病毒载体和病毒包装质粒共转染FT293细胞包装慢病毒FAM172A,测定病毒效价.Western blot和QPCR验证慢病毒FAM172A感染巨噬细胞效果.结果 菌液PCR、酶切及测序结果显示FAM172A基因成功插入到慢病毒载体中.病毒包装后荧光显微镜观察到FT293细胞中有大量绿色荧光,病毒效价为1.2×108TU/ml.Western blot和QPCR结果显示,慢病毒FAM172A侵染靶细胞后可明显增加目的基因FAM172A的表达.结论 成功构建慢病毒FAM172A,为后续FAM172A基因功能研究奠定了基础.
    목적 구건인FAM172A기인만병독재체,병포장만병독FAM172A감염인거서세포여이감정.방법 이PDC315-FAM172A위모판확증FAM172A기인전장서렬후,여만병독재체pLenti6.3/V5-GFP경매절、련접전화대장간균,도취양성극륭,행균액PCR、매절급측서감정.장감정정학적FAM172A기인만병독재체화병독포장질립공전염FT293세포포장만병독FAM172A,측정병독효개.Western blot화QPCR험증만병독FAM172A감염거서세포효과.결과 균액PCR、매절급측서결과현시FAM172A기인성공삽입도만병독재체중.병독포장후형광현미경관찰도FT293세포중유대량록색형광,병독효개위1.2×108TU/ml.Western blot화QPCR결과현시,만병독FAM172A침염파세포후가명현증가목적기인FAM172A적표체.결론 성공구건만병독FAM172A,위후속FAM172A기인공능연구전정료기출.
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