林业科学
林業科學
임업과학
SCIENTIA SILVAE SINICAE
2014年
3期
38-44
,共7页
唐欣%王瑞辉%杨秀艳%朱建峰%刘正祥%倪建伟%张华新
唐訢%王瑞輝%楊秀豔%硃建峰%劉正祥%倪建偉%張華新
당흔%왕서휘%양수염%주건봉%류정상%예건위%장화신
唐古特白刺%液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白%NtNHX1基因%基因克隆%表达分析
唐古特白刺%液泡膜Na+/H+逆嚮轉運蛋白%NtNHX1基因%基因剋隆%錶達分析
당고특백자%액포막Na+/H+역향전운단백%NtNHX1기인%기인극륭%표체분석
Nitraria tangutorum%Na+/H+ antiporter%NtNHX1%gene cloning%expression analysis
植物液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白具有将胞质中过多的Na+区隔化在液泡内,从而减轻过量Na+对细胞质的伤害,同时维持细胞的渗透势,利于植物抵御盐胁迫.以2年生唐古特白刺嫩叶为试材,采用RT-PCR和RACE方法从叶片中获得1个NHX基因cDNA全长,命名为NtNHX1,GenBank登录号为KF751928.序列分析结果表明:NtNHX1全长2 134 bp,包含281 bp的5’非编码区、218 bp的3’非编码区和29 bp的poly(A)尾巴.该cDNA编码1个544个氨基酸的多肽,等电点为8.14,推测分子质量为59.9 kDa.通过与其他物种的NHX1氨基酸序列比对,NtNHX1基因与柑橘同源性最高达81％.NtNHX1基因存在12个跨膜结构域,其中TM3跨膜结构域上具有高度保守的氨氯吡嗪脒结合位点(LFFIYLLPPI).该位点与Na+有竞争作用.相对荧光定量PCR分析表明,NtNHX1在根、茎、叶中均有表达,叶中的表达量明显高于茎和根;在高浓度盐(200 mmol· L-1 NaCl)处理下,NtNHX1在叶中的转录水平显著增强,在处理12 h后表达量达到最大值.由此推断,NtNHX1基因的表达与盐胁迫的诱导和调节有关.
植物液泡膜Na+/H+逆嚮轉運蛋白具有將胞質中過多的Na+區隔化在液泡內,從而減輕過量Na+對細胞質的傷害,同時維持細胞的滲透勢,利于植物牴禦鹽脅迫.以2年生唐古特白刺嫩葉為試材,採用RT-PCR和RACE方法從葉片中穫得1箇NHX基因cDNA全長,命名為NtNHX1,GenBank登錄號為KF751928.序列分析結果錶明:NtNHX1全長2 134 bp,包含281 bp的5’非編碼區、218 bp的3’非編碼區和29 bp的poly(A)尾巴.該cDNA編碼1箇544箇氨基痠的多肽,等電點為8.14,推測分子質量為59.9 kDa.通過與其他物種的NHX1氨基痠序列比對,NtNHX1基因與柑橘同源性最高達81％.NtNHX1基因存在12箇跨膜結構域,其中TM3跨膜結構域上具有高度保守的氨氯吡嗪脒結閤位點(LFFIYLLPPI).該位點與Na+有競爭作用.相對熒光定量PCR分析錶明,NtNHX1在根、莖、葉中均有錶達,葉中的錶達量明顯高于莖和根;在高濃度鹽(200 mmol· L-1 NaCl)處理下,NtNHX1在葉中的轉錄水平顯著增彊,在處理12 h後錶達量達到最大值.由此推斷,NtNHX1基因的錶達與鹽脅迫的誘導和調節有關.
식물액포막Na+/H+역향전운단백구유장포질중과다적Na+구격화재액포내,종이감경과량Na+대세포질적상해,동시유지세포적삼투세,리우식물저어염협박.이2년생당고특백자눈협위시재,채용RT-PCR화RACE방법종협편중획득1개NHX기인cDNA전장,명명위NtNHX1,GenBank등록호위KF751928.서렬분석결과표명:NtNHX1전장2 134 bp,포함281 bp적5’비편마구、218 bp적3’비편마구화29 bp적poly(A)미파.해cDNA편마1개544개안기산적다태,등전점위8.14,추측분자질량위59.9 kDa.통과여기타물충적NHX1안기산서렬비대,NtNHX1기인여감귤동원성최고체81％.NtNHX1기인존재12개과막결구역,기중TM3과막결구역상구유고도보수적안록필진미결합위점(LFFIYLLPPI).해위점여Na+유경쟁작용.상대형광정량PCR분석표명,NtNHX1재근、경、협중균유표체,협중적표체량명현고우경화근;재고농도염(200 mmol· L-1 NaCl)처리하,NtNHX1재협중적전록수평현저증강,재처리12 h후표체량체도최대치.유차추단,NtNHX1기인적표체여염협박적유도화조절유관.
