现代肿瘤医学
現代腫瘤醫學
현대종류의학
JOURNAL OF MODERN ONCOLOGY
2014年
4期
795-798
,共4页
ZNF278%质粒构建%细胞增殖%胃癌
ZNF278%質粒構建%細胞增殖%胃癌
ZNF278%질립구건%세포증식%위암
ZNF278%plasmid construction%cell proliferation%gastric cancer
目的:构建pcDNA3.1-ZNF278重组人真核表达质粒,研究ZNF278对胃癌细胞增殖和周期的影响.方法:PCR扩增正常人胃黏膜组织中的ZNF278基因,并用EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切,与酶切后的pcDNA3.1-myc-his载体连接,转化DH5α大肠杆菌,克隆筛选,提取重组质粒,酶切鉴定并测序.重组人ZNF278真核表达质粒转染胃癌细胞系SGC7901,定量PCR和Western blot技术检测ZNF278表达状况,利用MTT和细胞记数法检测细胞增殖,同时分析细胞周期变化.结果:测序证实pcDNA3.1-ZNF278真核表达质粒构建成功,并成功转染SGC7901细胞,检测确认ZNF278表达上调,转染重组pcDNA3.1-ZNF278质粒的SGC7901细胞较对照组生长加快,促进细胞周期进入S期.结论:pcDNA3.1-ZNF278重组质粒构建成功,并可促进胃癌细胞系SGC7901细胞增殖和细胞进入分裂期.
目的:構建pcDNA3.1-ZNF278重組人真覈錶達質粒,研究ZNF278對胃癌細胞增殖和週期的影響.方法:PCR擴增正常人胃黏膜組織中的ZNF278基因,併用EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ雙酶切,與酶切後的pcDNA3.1-myc-his載體連接,轉化DH5α大腸桿菌,剋隆篩選,提取重組質粒,酶切鑒定併測序.重組人ZNF278真覈錶達質粒轉染胃癌細胞繫SGC7901,定量PCR和Western blot技術檢測ZNF278錶達狀況,利用MTT和細胞記數法檢測細胞增殖,同時分析細胞週期變化.結果:測序證實pcDNA3.1-ZNF278真覈錶達質粒構建成功,併成功轉染SGC7901細胞,檢測確認ZNF278錶達上調,轉染重組pcDNA3.1-ZNF278質粒的SGC7901細胞較對照組生長加快,促進細胞週期進入S期.結論:pcDNA3.1-ZNF278重組質粒構建成功,併可促進胃癌細胞繫SGC7901細胞增殖和細胞進入分裂期.
목적:구건pcDNA3.1-ZNF278중조인진핵표체질립,연구ZNF278대위암세포증식화주기적영향.방법:PCR확증정상인위점막조직중적ZNF278기인,병용EcoR Ⅰ화Hind Ⅲ쌍매절,여매절후적pcDNA3.1-myc-his재체련접,전화DH5α대장간균,극륭사선,제취중조질립,매절감정병측서.중조인ZNF278진핵표체질립전염위암세포계SGC7901,정량PCR화Western blot기술검측ZNF278표체상황,이용MTT화세포기수법검측세포증식,동시분석세포주기변화.결과:측서증실pcDNA3.1-ZNF278진핵표체질립구건성공,병성공전염SGC7901세포,검측학인ZNF278표체상조,전염중조pcDNA3.1-ZNF278질립적SGC7901세포교대조조생장가쾌,촉진세포주기진입S기.결론:pcDNA3.1-ZNF278중조질립구건성공,병가촉진위암세포계SGC7901세포증식화세포진입분렬기.
