现代肿瘤医学
現代腫瘤醫學
현대종류의학
JOURNAL OF MODERN ONCOLOGY
2014年
4期
759-761
,共3页
李明华%张芳婷%高书颖%于洁
李明華%張芳婷%高書穎%于潔
리명화%장방정%고서영%우길
Notch信号通道%鼻咽癌%质粒构建
Notch信號通道%鼻嚥癌%質粒構建
Notch신호통도%비인암%질립구건
Notch signal pathway%nasopharyngeal carcinoma%vector construction
目的:构建能够在鼻咽癌细胞株中高效表达人Notch1信号胞内段(NIC)的荧光质粒.方法:通过RT-PCR获得人NIC的cDNA;利用基因重组技术插入到pEGFP-N1中;在脂质体介导下转染人低分化鼻咽癌细胞CNE2后,经荧光显微镜、RT-PCR和Western blot检测NIC的表达情况.结果:RT-PCR方法得到一条2424bp的特异性扩增产物,酶切和基因测序结果表明重组质粒构建成功.转染48h后,检测到绿色荧光表达,RT-PCR和Western blot的结果显示NIC的表达量升高.结论:正确构建了人NIC荧光表达质粒.该质粒能够在鼻咽癌细胞株中高效表达,为研究Notch信号通路在鼻咽癌中的作用奠定了实验基础.
目的:構建能夠在鼻嚥癌細胞株中高效錶達人Notch1信號胞內段(NIC)的熒光質粒.方法:通過RT-PCR穫得人NIC的cDNA;利用基因重組技術插入到pEGFP-N1中;在脂質體介導下轉染人低分化鼻嚥癌細胞CNE2後,經熒光顯微鏡、RT-PCR和Western blot檢測NIC的錶達情況.結果:RT-PCR方法得到一條2424bp的特異性擴增產物,酶切和基因測序結果錶明重組質粒構建成功.轉染48h後,檢測到綠色熒光錶達,RT-PCR和Western blot的結果顯示NIC的錶達量升高.結論:正確構建瞭人NIC熒光錶達質粒.該質粒能夠在鼻嚥癌細胞株中高效錶達,為研究Notch信號通路在鼻嚥癌中的作用奠定瞭實驗基礎.
목적:구건능구재비인암세포주중고효표체인Notch1신호포내단(NIC)적형광질립.방법:통과RT-PCR획득인NIC적cDNA;이용기인중조기술삽입도pEGFP-N1중;재지질체개도하전염인저분화비인암세포CNE2후,경형광현미경、RT-PCR화Western blot검측NIC적표체정황.결과:RT-PCR방법득도일조2424bp적특이성확증산물,매절화기인측서결과표명중조질립구건성공.전염48h후,검측도록색형광표체,RT-PCR화Western blot적결과현시NIC적표체량승고.결론:정학구건료인NIC형광표체질립.해질립능구재비인암세포주중고효표체,위연구Notch신호통로재비인암중적작용전정료실험기출.
