上海交通大学学报（农业科学版）
上海交通大學學報（農業科學版）
상해교통대학학보（농업과학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(AGRICULTURAL SCIENCE)
2014年
2期
31-35
,共5页
傅艳琨%郭亮%华修国%崔立
傅豔琨%郭亮%華脩國%崔立
부염곤%곽량%화수국%최립
人核糖体蛋白%RPS11%原核表达%蛋白纯化
人覈糖體蛋白%RPS11%原覈錶達%蛋白純化
인핵당체단백%RPS11%원핵표체%단백순화
protein of human ribosomal%RPS11%prokaryotic expression%purification
RPS11是核糖体小亚基40S的组成部分,属于核糖体蛋白S17p家族,由RPS11基因所编码,主要存在于真核生物中.本研究通过PCR扩增RPS11基因,构建pET43 a-RPS11和pGEX-4T-1-RPS11原核表达载体.将重组质粒转入E.coli DH5α,序列测定正确后,将其转入E.coli BL21 (DE3),加入IPTG诱导表达.表达蛋白经SDS-PAGE分析后,利用亲和层析法纯化蛋白.结果成功克隆RPS11基因,构建了原核表达载体pET43 a-RPS11和pGEX-4 T-1-RPS11,转化宿主菌E.coli BL21 (DE3)中进行了表达.SDS-PAGE分析证实表达目的蛋白正确.通过Ni-TNA和GSH-Sepharose层析柱获得纯化蛋白,为进一步研究该蛋白的生物学功能奠定了基础.
RPS11是覈糖體小亞基40S的組成部分,屬于覈糖體蛋白S17p傢族,由RPS11基因所編碼,主要存在于真覈生物中.本研究通過PCR擴增RPS11基因,構建pET43 a-RPS11和pGEX-4T-1-RPS11原覈錶達載體.將重組質粒轉入E.coli DH5α,序列測定正確後,將其轉入E.coli BL21 (DE3),加入IPTG誘導錶達.錶達蛋白經SDS-PAGE分析後,利用親和層析法純化蛋白.結果成功剋隆RPS11基因,構建瞭原覈錶達載體pET43 a-RPS11和pGEX-4 T-1-RPS11,轉化宿主菌E.coli BL21 (DE3)中進行瞭錶達.SDS-PAGE分析證實錶達目的蛋白正確.通過Ni-TNA和GSH-Sepharose層析柱穫得純化蛋白,為進一步研究該蛋白的生物學功能奠定瞭基礎.
RPS11시핵당체소아기40S적조성부분,속우핵당체단백S17p가족,유RPS11기인소편마,주요존재우진핵생물중.본연구통과PCR확증RPS11기인,구건pET43 a-RPS11화pGEX-4T-1-RPS11원핵표체재체.장중조질립전입E.coli DH5α,서렬측정정학후,장기전입E.coli BL21 (DE3),가입IPTG유도표체.표체단백경SDS-PAGE분석후,이용친화층석법순화단백.결과성공극륭RPS11기인,구건료원핵표체재체pET43 a-RPS11화pGEX-4 T-1-RPS11,전화숙주균E.coli BL21 (DE3)중진행료표체.SDS-PAGE분석증실표체목적단백정학.통과Ni-TNA화GSH-Sepharose층석주획득순화단백,위진일보연구해단백적생물학공능전정료기출.
