解放军医学院学报
解放軍醫學院學報
해방군의학원학보
Academic Journal of Chinese Pla Medical School
2014年
4期
369-373
,共5页
胡小龙%张春阳%于立春%彭新鑫%高晓霞
鬍小龍%張春暘%于立春%彭新鑫%高曉霞
호소룡%장춘양%우립춘%팽신흠%고효하
转染%前列腺癌%细胞凋亡%抑癌基因p53%张力蛋白同源物
轉染%前列腺癌%細胞凋亡%抑癌基因p53%張力蛋白同源物
전염%전렬선암%세포조망%억암기인p53%장력단백동원물
transfection%prostate cancer%apoptosis%tumor suppressor gene p53%phosphatase and tensin homolog
目的 研究抑癌PTEN基因联合p53基因转染对前列腺癌PC-3m细胞凋亡的影响.方法 构建表达载体:空质粒pEGFP-N1、pEGFP-N1-PTEN质粒、pEGFP-N1-p53质粒及pEGFP-N1-PTEN-p53质粒,体外分别转染到前列腺癌PC-3m细胞中,观察它们转染后的荧光表达情况;采用RT-PCR法检测目的基因表达;Western blotting法检测目的PTEN蛋白和P53蛋白的表达;用MTT法观察细胞增殖抑制情况并绘制生长抑制曲线;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测PTEN基因和p53基因对前列腺癌PC-3m细胞凋亡的影响.结果 荧光显微镜下观察到PTEN、p53及两个基因同时在PC-3m细胞系中成功表达;RT-PCR检测结果显示,与PTEN基因单转染组、p53基因单转染组和空载体转染组相比联合转染组mRNA在PC-3m细胞系中表达明显增加(P＜0.05);Western blotting法检测同样发现,联合转染组PTEN蛋白及P53蛋白表达明显高于PTEN基因单转染组、p53基因单转染组和空载体转染组(P＜0.05);联合转染组细胞凋亡率明显高于空载体转染组、PTEN基因单转染组和p53基因单转染组(P＜0.05).结论 PTEN基因与p53基因联合转染能诱导前列腺癌PC-3m细胞凋亡,这种联合转染可能对前列腺癌的基因治疗具有潜在的应用价值.
目的 研究抑癌PTEN基因聯閤p53基因轉染對前列腺癌PC-3m細胞凋亡的影響.方法 構建錶達載體:空質粒pEGFP-N1、pEGFP-N1-PTEN質粒、pEGFP-N1-p53質粒及pEGFP-N1-PTEN-p53質粒,體外分彆轉染到前列腺癌PC-3m細胞中,觀察它們轉染後的熒光錶達情況;採用RT-PCR法檢測目的基因錶達;Western blotting法檢測目的PTEN蛋白和P53蛋白的錶達;用MTT法觀察細胞增殖抑製情況併繪製生長抑製麯線;Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞術檢測PTEN基因和p53基因對前列腺癌PC-3m細胞凋亡的影響.結果 熒光顯微鏡下觀察到PTEN、p53及兩箇基因同時在PC-3m細胞繫中成功錶達;RT-PCR檢測結果顯示,與PTEN基因單轉染組、p53基因單轉染組和空載體轉染組相比聯閤轉染組mRNA在PC-3m細胞繫中錶達明顯增加(P＜0.05);Western blotting法檢測同樣髮現,聯閤轉染組PTEN蛋白及P53蛋白錶達明顯高于PTEN基因單轉染組、p53基因單轉染組和空載體轉染組(P＜0.05);聯閤轉染組細胞凋亡率明顯高于空載體轉染組、PTEN基因單轉染組和p53基因單轉染組(P＜0.05).結論 PTEN基因與p53基因聯閤轉染能誘導前列腺癌PC-3m細胞凋亡,這種聯閤轉染可能對前列腺癌的基因治療具有潛在的應用價值.
목적 연구억암PTEN기인연합p53기인전염대전렬선암PC-3m세포조망적영향.방법 구건표체재체:공질립pEGFP-N1、pEGFP-N1-PTEN질립、pEGFP-N1-p53질립급pEGFP-N1-PTEN-p53질립,체외분별전염도전렬선암PC-3m세포중,관찰타문전염후적형광표체정황;채용RT-PCR법검측목적기인표체;Western blotting법검측목적PTEN단백화P53단백적표체;용MTT법관찰세포증식억제정황병회제생장억제곡선;Annexin V-FITC/PI쌍염류식세포술검측PTEN기인화p53기인대전렬선암PC-3m세포조망적영향.결과 형광현미경하관찰도PTEN、p53급량개기인동시재PC-3m세포계중성공표체;RT-PCR검측결과현시,여PTEN기인단전염조、p53기인단전염조화공재체전염조상비연합전염조mRNA재PC-3m세포계중표체명현증가(P＜0.05);Western blotting법검측동양발현,연합전염조PTEN단백급P53단백표체명현고우PTEN기인단전염조、p53기인단전염조화공재체전염조(P＜0.05);연합전염조세포조망솔명현고우공재체전염조、PTEN기인단전염조화p53기인단전염조(P＜0.05).결론 PTEN기인여p53기인연합전염능유도전렬선암PC-3m세포조망,저충연합전염가능대전렬선암적기인치료구유잠재적응용개치.
