解放军医学院学报
解放軍醫學院學報
해방군의학원학보
Academic Journal of Chinese Pla Medical School
2014年
4期
365-368
,共4页
陈修思%王涛%穆长征%王小梅%田鹤
陳脩思%王濤%穆長徵%王小梅%田鶴
진수사%왕도%목장정%왕소매%전학
微小RNA%神经元素3%胰岛素分泌细胞%小鼠
微小RNA%神經元素3%胰島素分泌細胞%小鼠
미소RNA%신경원소3%이도소분비세포%소서
miRNA%neurogenin3%insulin-producing cells%mice
目的 实现骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,bMSCs)向胰岛素分泌细胞(insulin-producing cells,IPCs)的诱导分化并验证分化过程中miR-106b靶向调控Ngn3基因表达.方法 首先,分离培养bMSCs,应用活化素A(activin A)和B细胞素(beta cellulin)将其诱导分化为IPCs.然后,采用靶基因预测软件miRanda和TargetScan对miR-106b和Ngn3基因的靶向匹配关系进行预测并通过双荧光素酶报告基因系统鉴定.qRT-PCR检测诱导分化过程中miR-106b和Ngn3的表达.结果 诱导分化后的细胞双硫腙染色呈猩红色,免疫荧光化学显示有胰岛素表达.生物信息学方法预测发现miR-106b和Ngn3基因二者匹配良好,通过双荧光素酶报告基因系统检测发现miR-106b能结合到Ngn3 mRNA的3'UTR并有效抑制其表达.qRT-PCR检测结果表明,miR-106b的表达水平与Ngn3表达呈负相关.结论 miR-106b能调控IPCs诱导分化过程中Ngn3的表达.
目的 實現骨髓間充質榦細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,bMSCs)嚮胰島素分泌細胞(insulin-producing cells,IPCs)的誘導分化併驗證分化過程中miR-106b靶嚮調控Ngn3基因錶達.方法 首先,分離培養bMSCs,應用活化素A(activin A)和B細胞素(beta cellulin)將其誘導分化為IPCs.然後,採用靶基因預測軟件miRanda和TargetScan對miR-106b和Ngn3基因的靶嚮匹配關繫進行預測併通過雙熒光素酶報告基因繫統鑒定.qRT-PCR檢測誘導分化過程中miR-106b和Ngn3的錶達.結果 誘導分化後的細胞雙硫腙染色呈猩紅色,免疫熒光化學顯示有胰島素錶達.生物信息學方法預測髮現miR-106b和Ngn3基因二者匹配良好,通過雙熒光素酶報告基因繫統檢測髮現miR-106b能結閤到Ngn3 mRNA的3'UTR併有效抑製其錶達.qRT-PCR檢測結果錶明,miR-106b的錶達水平與Ngn3錶達呈負相關.結論 miR-106b能調控IPCs誘導分化過程中Ngn3的錶達.
목적 실현골수간충질간세포(bone marrow mesenchymal stem cells,bMSCs)향이도소분비세포(insulin-producing cells,IPCs)적유도분화병험증분화과정중miR-106b파향조공Ngn3기인표체.방법 수선,분리배양bMSCs,응용활화소A(activin A)화B세포소(beta cellulin)장기유도분화위IPCs.연후,채용파기인예측연건miRanda화TargetScan대miR-106b화Ngn3기인적파향필배관계진행예측병통과쌍형광소매보고기인계통감정.qRT-PCR검측유도분화과정중miR-106b화Ngn3적표체.결과 유도분화후적세포쌍류종염색정성홍색,면역형광화학현시유이도소표체.생물신식학방법예측발현miR-106b화Ngn3기인이자필배량호,통과쌍형광소매보고기인계통검측발현miR-106b능결합도Ngn3 mRNA적3'UTR병유효억제기표체.qRT-PCR검측결과표명,miR-106b적표체수평여Ngn3표체정부상관.결론 miR-106b능조공IPCs유도분화과정중Ngn3적표체.
