CAJ | 학술논문

为了探讨和优化应用流式细胞术(FCM)测定药用植物的基因组大小(或称C值)的方法,分别以新鲜、幼嫩和硅胶干燥的叶片为材料,采用Otto和LB01两种细胞核提取液,利用流式细胞术对黄芩C值进行测定.结果表明,选用豌豆为内标植物时,相比LB01一步法,Otto两步法在低温提取、离心和保存条件下,碘化丙啶染色浓度为0.02 mg/mL,得到的细胞核散点图相对集中,碎片较少,容易准确取门,CV较小.不同提取材料表明,幼嫩叶片和新鲜叶片利用Otto二步法均能得到高质量的细胞核悬液,细胞核数量多且散点图集中,有利于取门和测定的C值更准确.而干燥叶片提取的细胞核得到的散点图分散,无法准确取门和测定C值.最终,系统地优化了利用流式细胞术测定药用植物黄芩基因组大小的方法,并首次成功测定黄芩1C值为0.58 pg,基因组大小约为562 Mbp.这一研究结果,将为了解黄芩的基因组值大小和利用流式细胞术测定其他药用植物C值提供参考,并将为黄芩属药用植物资源的遗传评价和保护利用等研究奠定基础.
위료탐토화우화응용류식세포술(FCM)측정약용식물적기인조대소(혹칭C치)적방법,분별이신선、유눈화규효간조적협편위재료,채용Otto화LB01량충세포핵제취액,이용류식세포술대황금C치진행측정.결과표명,선용완두위내표식물시,상비LB01일보법,Otto량보법재저온제취、리심화보존조건하,전화병정염색농도위0.02 mg/mL,득도적세포핵산점도상대집중,쇄편교소,용역준학취문,CV교소.불동제취재료표명,유눈협편화신선협편이용Otto이보법균능득도고질량적세포핵현액,세포핵수량다차산점도집중,유리우취문화측정적C치경준학.이간조협편제취적세포핵득도적산점도분산,무법준학취문화측정C치.최종,계통지우화료이용류식세포술측정약용식물황금기인조대소적방법,병수차성공측정황금1C치위0.58 pg,기인조대소약위562 Mbp.저일연구결과,장위료해황금적기인조치대소화이용류식세포술측정기타약용식물C치제공삼고,병장위황금속약용식물자원적유전평개화보호이용등연구전정기출.