西南农业学报
西南農業學報
서남농업학보
SOUTHWEST CHINA JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
2期
892-895
,共4页
张雨丽%龙定沛%张桂征%闭立辉%赵爱春
張雨麗%龍定沛%張桂徵%閉立輝%趙愛春
장우려%룡정패%장계정%폐립휘%조애춘
杂交转育%整合位点%拷贝数%反向PCR%Southern杂交
雜交轉育%整閤位點%拷貝數%反嚮PCR%Southern雜交
잡교전육%정합위점%고패수%반향PCR%Southern잡교
Hybrization%Integration sites%Copy numbers%Inverse PCR%Southern blotting
为了解转基因家蚕在杂交转育和累代选育过程中,外源基因在基因组上的整合位点和拷贝数变化情况,通过反向PCR和douthern杂交,测定外源基因在杂交一代和三代品系的拷贝数与插入位点.反向PCR结果显示,所有样品均只扩增出一条片段,且大小一致.对扩增片段进行克隆测序和比对发现,外源基因均系插入同一位点,位于24号染色体.Southern blotting试验结果表明各试验样品均得到了较好的一条杂交信号,而对照没有杂交信号,说明外源基因在各个样品中均系单拷贝插入,而且插入的位置没有随着转育和传代培养面发生变化.研究结果表明外源基因可稳定遗传,将此转基因材料与常规品种材料进行杂交,选育优良家蚕品种的方法是有效可行的.
為瞭解轉基因傢蠶在雜交轉育和纍代選育過程中,外源基因在基因組上的整閤位點和拷貝數變化情況,通過反嚮PCR和douthern雜交,測定外源基因在雜交一代和三代品繫的拷貝數與插入位點.反嚮PCR結果顯示,所有樣品均隻擴增齣一條片段,且大小一緻.對擴增片段進行剋隆測序和比對髮現,外源基因均繫插入同一位點,位于24號染色體.Southern blotting試驗結果錶明各試驗樣品均得到瞭較好的一條雜交信號,而對照沒有雜交信號,說明外源基因在各箇樣品中均繫單拷貝插入,而且插入的位置沒有隨著轉育和傳代培養麵髮生變化.研究結果錶明外源基因可穩定遺傳,將此轉基因材料與常規品種材料進行雜交,選育優良傢蠶品種的方法是有效可行的.
위료해전기인가잠재잡교전육화루대선육과정중,외원기인재기인조상적정합위점화고패수변화정황,통과반향PCR화douthern잡교,측정외원기인재잡교일대화삼대품계적고패수여삽입위점.반향PCR결과현시,소유양품균지확증출일조편단,차대소일치.대확증편단진행극륭측서화비대발현,외원기인균계삽입동일위점,위우24호염색체.Southern blotting시험결과표명각시험양품균득도료교호적일조잡교신호,이대조몰유잡교신호,설명외원기인재각개양품중균계단고패삽입,이차삽입적위치몰유수착전육화전대배양면발생변화.연구결과표명외원기인가은정유전,장차전기인재료여상규품충재료진행잡교,선육우량가잠품충적방법시유효가행적.
