中国心血管病研究
中國心血管病研究
중국심혈관병연구
CHINESE JOURNAL OF CARDIOVASCULAR REVIEW
2014年
5期
442-448
,共7页
杨啸%范丽芬%姚艳玲%焦向英
楊嘯%範麗芬%姚豔玲%焦嚮英
양소%범려분%요염령%초향영
硫氧还蛋白%凋亡%胰高血糖样多肽-1%心肌细胞
硫氧還蛋白%凋亡%胰高血糖樣多肽-1%心肌細胞
류양환단백%조망%이고혈당양다태-1%심기세포
Thioredoxin%Apoptosis%GLP-1%Cardiomyocyte
目的 以高糖刺激的乳鼠心肌细胞模拟糖尿病诱导心肌细胞损伤,给予胰高血糖样多肽-1(GLP-1)预处理,观察其对高糖引起的心肌细胞凋亡的影响,以及细胞内硫氧还蛋白(Trx)系统的变化.方法 将分离培养48 h的大鼠乳鼠心肌细胞分为3组:①正常对照组:使用含葡萄糖5.5 mmol/L的DMEM培养基加入甘露醇20 mmol/L作为对照培养基进行培养;②高糖组:使用含葡萄糖25 mmol/L的DMEM培养基作为高糖培养基进行培养模拟糖尿病;③高糖+ GLP-1组:以含葡萄糖25 mmol/L的DMEM培养基加入终浓度10 nmol/L的GLP-1继续培养模拟糖尿病GLP-1干预.心肌细胞分别在三种培养基中培养24h后测定指标.结果 ①与正常组比较,高糖组细胞乳酸脱氢酶活性、细胞凋亡率、p38激酶活性均显著升高,Trx活性明显降低(P＜0.05);硫氧还蛋白表达无明显变化,但细胞内蛋白硝基化的标志物3-硝基酪氨酸生成量增加,Trx的内源性抑制蛋白硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)表达明显上调,活性氧(ROS)生成和丙二醛(MDA)的含量均明显升高(P均＜0.05).②与高糖组比较,高糖+GLP-1组乳酸脱氢酶活性、细胞凋亡率、p38激酶活性明显降低,Trx活性明显恢复(P＜0.05),3-硝基酪氨酸生成、TXNIP表达、活性氧生成和丙二醛的产生量均明显降低(P均＜0.05).结论 高糖可引起培养的乳鼠心肌细胞发生损伤和凋亡,这种损伤与高糖引起的Trx活性和功能下降有关.蛋白的硝基化、TXNIP的表达上调均可抑制Trx的活性,使其抗自由基和抗凋亡功能减弱,自由基生成增加,p38激酶介导的凋亡途径加强,进而引起心肌细胞损伤和凋亡.GLP-1处理可使高糖引起的TXNIP表达明显下调,蛋白硝基化减轻,Trx活性得到改善,细胞自由基损伤和凋亡减轻,通过对Trx系统的保护而逆转高糖引起的细胞损伤和凋亡.
目的 以高糖刺激的乳鼠心肌細胞模擬糖尿病誘導心肌細胞損傷,給予胰高血糖樣多肽-1(GLP-1)預處理,觀察其對高糖引起的心肌細胞凋亡的影響,以及細胞內硫氧還蛋白(Trx)繫統的變化.方法 將分離培養48 h的大鼠乳鼠心肌細胞分為3組:①正常對照組:使用含葡萄糖5.5 mmol/L的DMEM培養基加入甘露醇20 mmol/L作為對照培養基進行培養;②高糖組:使用含葡萄糖25 mmol/L的DMEM培養基作為高糖培養基進行培養模擬糖尿病;③高糖+ GLP-1組:以含葡萄糖25 mmol/L的DMEM培養基加入終濃度10 nmol/L的GLP-1繼續培養模擬糖尿病GLP-1榦預.心肌細胞分彆在三種培養基中培養24h後測定指標.結果 ①與正常組比較,高糖組細胞乳痠脫氫酶活性、細胞凋亡率、p38激酶活性均顯著升高,Trx活性明顯降低(P＜0.05);硫氧還蛋白錶達無明顯變化,但細胞內蛋白硝基化的標誌物3-硝基酪氨痠生成量增加,Trx的內源性抑製蛋白硫氧還蛋白相互作用蛋白(TXNIP)錶達明顯上調,活性氧(ROS)生成和丙二醛(MDA)的含量均明顯升高(P均＜0.05).②與高糖組比較,高糖+GLP-1組乳痠脫氫酶活性、細胞凋亡率、p38激酶活性明顯降低,Trx活性明顯恢複(P＜0.05),3-硝基酪氨痠生成、TXNIP錶達、活性氧生成和丙二醛的產生量均明顯降低(P均＜0.05).結論 高糖可引起培養的乳鼠心肌細胞髮生損傷和凋亡,這種損傷與高糖引起的Trx活性和功能下降有關.蛋白的硝基化、TXNIP的錶達上調均可抑製Trx的活性,使其抗自由基和抗凋亡功能減弱,自由基生成增加,p38激酶介導的凋亡途徑加彊,進而引起心肌細胞損傷和凋亡.GLP-1處理可使高糖引起的TXNIP錶達明顯下調,蛋白硝基化減輕,Trx活性得到改善,細胞自由基損傷和凋亡減輕,通過對Trx繫統的保護而逆轉高糖引起的細胞損傷和凋亡.
목적 이고당자격적유서심기세포모의당뇨병유도심기세포손상,급여이고혈당양다태-1(GLP-1)예처리,관찰기대고당인기적심기세포조망적영향,이급세포내류양환단백(Trx)계통적변화.방법 장분리배양48 h적대서유서심기세포분위3조:①정상대조조:사용함포도당5.5 mmol/L적DMEM배양기가입감로순20 mmol/L작위대조배양기진행배양;②고당조:사용함포도당25 mmol/L적DMEM배양기작위고당배양기진행배양모의당뇨병;③고당+ GLP-1조:이함포도당25 mmol/L적DMEM배양기가입종농도10 nmol/L적GLP-1계속배양모의당뇨병GLP-1간예.심기세포분별재삼충배양기중배양24h후측정지표.결과 ①여정상조비교,고당조세포유산탈경매활성、세포조망솔、p38격매활성균현저승고,Trx활성명현강저(P＜0.05);류양환단백표체무명현변화,단세포내단백초기화적표지물3-초기락안산생성량증가,Trx적내원성억제단백류양환단백상호작용단백(TXNIP)표체명현상조,활성양(ROS)생성화병이철(MDA)적함량균명현승고(P균＜0.05).②여고당조비교,고당+GLP-1조유산탈경매활성、세포조망솔、p38격매활성명현강저,Trx활성명현회복(P＜0.05),3-초기락안산생성、TXNIP표체、활성양생성화병이철적산생량균명현강저(P균＜0.05).결론 고당가인기배양적유서심기세포발생손상화조망,저충손상여고당인기적Trx활성화공능하강유관.단백적초기화、TXNIP적표체상조균가억제Trx적활성,사기항자유기화항조망공능감약,자유기생성증가,p38격매개도적조망도경가강,진이인기심기세포손상화조망.GLP-1처리가사고당인기적TXNIP표체명현하조,단백초기화감경,Trx활성득도개선,세포자유기손상화조망감경,통과대Trx계통적보호이역전고당인기적세포손상화조망.
