中国兽医杂志
中國獸醫雜誌
중국수의잡지
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE
2014年
4期
6-9
,共4页
张琳%余斌%刘跃生%张存%华炯钢%崔言顺
張琳%餘斌%劉躍生%張存%華炯鋼%崔言順
장림%여빈%류약생%장존%화형강%최언순
坦布苏病毒%囊膜蛋白%可溶表达%中和抗体
坦佈囌病毒%囊膜蛋白%可溶錶達%中和抗體
탄포소병독%낭막단백%가용표체%중화항체
用RT-PCR扩增鸭源坦布苏病毒YY5株的E蛋白基因片段,分别插入到表达载体pMBP-c、pET-GST、pET-His、pET-DsbA中,构建了一系列原核表达载体,转化入大肠杆菌E.coli Trans 10或DE3(plysS)宿主菌.工程菌株经诱导后进行SDS-PAGE,结果显示MBP-E融合蛋白得到了有效表达并且以可溶性蛋白的形式存在,且能与自然感染康复的鸭源多抗和鼠源单抗反应.以MBP-E免疫小鼠制备的高免血清,在体外可以中和DDTMUV,中和抗体效价达到1:46.重组蛋白MBP-E具有良好的免疫反应原性、免疫原性和体外免疫保护特性,这为进一步研制DTMUV重组亚单位疫苗奠定基础.
用RT-PCR擴增鴨源坦佈囌病毒YY5株的E蛋白基因片段,分彆插入到錶達載體pMBP-c、pET-GST、pET-His、pET-DsbA中,構建瞭一繫列原覈錶達載體,轉化入大腸桿菌E.coli Trans 10或DE3(plysS)宿主菌.工程菌株經誘導後進行SDS-PAGE,結果顯示MBP-E融閤蛋白得到瞭有效錶達併且以可溶性蛋白的形式存在,且能與自然感染康複的鴨源多抗和鼠源單抗反應.以MBP-E免疫小鼠製備的高免血清,在體外可以中和DDTMUV,中和抗體效價達到1:46.重組蛋白MBP-E具有良好的免疫反應原性、免疫原性和體外免疫保護特性,這為進一步研製DTMUV重組亞單位疫苗奠定基礎.
용RT-PCR확증압원탄포소병독YY5주적E단백기인편단,분별삽입도표체재체pMBP-c、pET-GST、pET-His、pET-DsbA중,구건료일계렬원핵표체재체,전화입대장간균E.coli Trans 10혹DE3(plysS)숙주균.공정균주경유도후진행SDS-PAGE,결과현시MBP-E융합단백득도료유효표체병차이가용성단백적형식존재,차능여자연감염강복적압원다항화서원단항반응.이MBP-E면역소서제비적고면혈청,재체외가이중화DDTMUV,중화항체효개체도1:46.중조단백MBP-E구유량호적면역반응원성、면역원성화체외면역보호특성,저위진일보연제DTMUV중조아단위역묘전정기출.
