工业微生物
工業微生物
공업미생물
INDUSTRIAL MICROBIOLOGY
2014年
2期
57-62
,共6页
邵明瑞%杨旭%刘和%符波%姜谦
邵明瑞%楊旭%劉和%符波%薑謙
소명서%양욱%류화%부파%강겸
DNA提取%土壤微生物%甲烷单加氧酶基因%丁烷单加氧酶基因
DNA提取%土壤微生物%甲烷單加氧酶基因%丁烷單加氧酶基因
DNA제취%토양미생물%갑완단가양매기인%정완단가양매기인
DNA extraction%soil microorganism%methane monooxygenase gene (pmoA gene)%butane monooxygenase gene (bmoX gene)
采用4种提取方法对油田上方6个土壤样品微生物总基因组DNA进行提取,并比较了其纯度和浓度.利用定量PCR技术定量分析各土壤中甲烷单加氧酶基因(pmoA)和丁烷单加氧酶基因(bmoX).与DNA试剂盒法相比,玻璃珠击打法、液氮研磨法、反复冻融法得到DNA纯度较低,需纯化才能进行后续的PCR扩增.液氮研磨法得到的DNA完整性、纯度和得率较其他提取方法均较好,尤其对于生物量较少的深层油田土壤DNA提取较为实用,成本较低.甲烷单加氧酶基因(pmoA)和丁烷单加氧酶基因(bmoX)的定量PCR结果表明,液氮研磨法提取DNA样品的定量结果在气区和油区均出现一定的高值.液氮研磨法较其他方法更适合于油田土壤DNA的提取.下一步研究可以把丁烷氧化菌作为油气指示菌研究中的重点检测对象.
採用4種提取方法對油田上方6箇土壤樣品微生物總基因組DNA進行提取,併比較瞭其純度和濃度.利用定量PCR技術定量分析各土壤中甲烷單加氧酶基因(pmoA)和丁烷單加氧酶基因(bmoX).與DNA試劑盒法相比,玻璃珠擊打法、液氮研磨法、反複凍融法得到DNA純度較低,需純化纔能進行後續的PCR擴增.液氮研磨法得到的DNA完整性、純度和得率較其他提取方法均較好,尤其對于生物量較少的深層油田土壤DNA提取較為實用,成本較低.甲烷單加氧酶基因(pmoA)和丁烷單加氧酶基因(bmoX)的定量PCR結果錶明,液氮研磨法提取DNA樣品的定量結果在氣區和油區均齣現一定的高值.液氮研磨法較其他方法更適閤于油田土壤DNA的提取.下一步研究可以把丁烷氧化菌作為油氣指示菌研究中的重點檢測對象.
채용4충제취방법대유전상방6개토양양품미생물총기인조DNA진행제취,병비교료기순도화농도.이용정량PCR기술정량분석각토양중갑완단가양매기인(pmoA)화정완단가양매기인(bmoX).여DNA시제합법상비,파리주격타법、액담연마법、반복동융법득도DNA순도교저,수순화재능진행후속적PCR확증.액담연마법득도적DNA완정성、순도화득솔교기타제취방법균교호,우기대우생물량교소적심층유전토양DNA제취교위실용,성본교저.갑완단가양매기인(pmoA)화정완단가양매기인(bmoX)적정량PCR결과표명,액담연마법제취DNA양품적정량결과재기구화유구균출현일정적고치.액담연마법교기타방법경괄합우유전토양DNA적제취.하일보연구가이파정완양화균작위유기지시균연구중적중점검측대상.
